过氧化氢诱导的氧化应激对ARPE-19细胞中泛素化途径的激活

摘要

目的探讨H2O2诱导的氧化应激对人视网膜色素上皮(RPE)细胞系ARPE-19细胞中泛素及泛素化蛋白表达的影响。方法MTT法建立H2O2诱导ARPE-19细胞模型。不同浓度H2O2作用于ARPE-19细胞后,RT-PCR检测细胞内泛素基因转录水平,细胞免疫荧光方法检测细胞内泛素化蛋白的表达。用有(或无)蛋白酶体抑制剂MG-132预处理后再用H2O2处理ARPE-19,Western blot方法检测细胞内泛素化蛋白。结果氧化应激后UBA、UBB的转录水平明显增加(P<0.05),UBC无明显变化。细胞内相对分子质量为50000～250000的泛素化蛋白均增加,MG-132预处理后再用H2O2处理,细胞内增加的泛素化蛋白则多集中在相对分子质量75000以上。细胞内泛素化蛋白表达增加,核内增加明显。结论H2O2诱导的ARPE-19氧化应激过程激活细胞内泛素化途径。