缬沙坦和氟伐他汀对糖尿病大鼠视网膜糖原合成激酶3β表达的影响

摘要

背景糖原合成激酶3p（GSK-3p）在糖代谢过程中起着重要作用，可能对糖尿病视网膜病变（DR）的发生有一定影响。研究表明缬沙坦能改善糖尿病鼠视网膜的视觉电生理表现。目的探讨缬沙坦和氟伐他汀对糖尿病大鼠视网膜GSK-3B表达的影响。方法将50只sD大鼠通过一次性腹腔注射65mg／kg链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病模型，用随机数字表法将造模成功的47只大鼠随机分为4组。糖尿病对照组（12只）灌服质量分数0．5％羧甲基纤维素钠作为阳性对照，缬沙坦组（12只）、氟伐他汀组（11只）和缬沙坦联合氟伐他汀组（12只）分别于造模后3d灌服缬沙坦悬液、氟伐他汀悬液、缬沙坦＋氟伐他汀悬液，每日1次，共12周。另纳入10只正常大鼠作为正常对照组，给予质量分数0．1％柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液进行腹腔注射，然后灌服0．5％羧甲基纤维素钠溶液。用药12周后采集各组大鼠尾静脉血检测大鼠空腹血糖水平；采用Westernblot法检测p-GSK-3B（Ser-9）蛋白在大鼠视网膜中的表达；采用免疫组织化学法检测p-GSK．3S（Set-9）在视网膜的表达定位。结果给药12周后，正常对照组、糖尿病对照组、缬沙坦组、氟伐他汀组及缬沙坦联合氟伐他汀组的空腹血糖分别为（5．28s0．30）、（26．08_＋3．33）、（26．03_＋2．66）、（25．90_＋2．86）、（25．99s2．14）mmol／L，差异有统计学意义（F=110．74，P〈0．01）。Westernblot结果显示，糖尿病对照组大鼠视网膜中p-GSK-3B（Ser-9）／13-aetin灰度值显著高于正常对照组（2．774s0．139”s1．927s0．111，q=15．79，P〈0．01）；缬沙坦组、氟伐他汀组及缬沙坦联合氟伐他汀组p-GSK-3B（Ser．9）表达显著低于糖尿病对照组（1．895±0．090、2．051±0．113、1．537±0．071口s2．774s0．139）（q=13．69、13．48、23．06，P〈0．01），且缬沙坦联合氟伐他汀组显著低于缬沙坦组和氟伐他汀组（q=6．67、9．58，P〈0．01）。免疫组织化学检测显示，p-GSK-3B（Ser-9）主要表达于视网膜神经节细胞层（GCL），正常对照组视网膜各层中p-GSK-3B（Ser-9）均呈弱表达，GCL略强。糖尿病对照组视网膜各层p-GSK-3B（Ser-9）表达较强，呈深棕色着染，但仍以GCL最为明显。缬沙坦组与氟伐他汀组各层视网膜p-GSK-3B（Ser-9）着色较糖尿病对照组明显减弱。缬沙坦联合氟伐他汀组各层视网膜p-GSK-3p（Ser-9）着色进一步减弱。结论糖尿病大鼠视网膜中p-GSK-3p（Set-9）的表达增加，主要位于GCL。缬沙坦、氟伐他汀均能够抑制p-GSK-3B（Set-9）的表达，联合用药作用更强。