人PrP特异性多肽抗体的鉴定和应用

摘要

目的为了进一步检测制备的人PrP特异性多肽抗体的免疫反应性和特异性.方法构建人PrP N端缺失原核表达质粒,表达并纯化N端缺失的PrP蛋白;Western blot检测多肽抗体与纯化的各种人全长、N端缺失以及C端缺失PrP蛋白的反应能力;免疫荧光法检测多肽抗体与真核表达的人PrP蛋白反应能力;提取Creutzfeldt-Jakob病(CJD)病人以及Scrapie感染的仓鼠脑组织,Western blot 检测多肽抗体与致病性PrP-res蛋白的反应能力.结果所制备的PrP多肽抗体能与原核及真核细胞表达的各种不同长度的PrP蛋白反应,同时还能特异性识别Scrapie感染鼠脑组织中和CJD病人脑组织中的PrP-res蛋白.结论多肽抗体具备良好的免疫反应性和特异性,可以应用于临床CJD病人的检测.