从钙离子调控改变探讨兔肾素血管紧张素系统阻断剂逆转甲状腺素促心肌肥厚的机制

摘要

目的研究甲状腺素诱导的肥厚心肌细胞内钙调控变化及其机制,探讨肾素血管紧张素系统（RAS）阻断剂逆转甲状腺素促心肌肥厚的机制。方法腹腔注射左旋甲状腺素（L-Thy）建立兔甲状腺素性心肌肥厚模型,经胸二维超声心动图测定室间隔厚度（IVS）、左心室内径（LV）及左心室后壁厚度（LVPW）后收集心肌标本,光镜及透射电镜下观察心肌细胞结构改变,Fluo3/AM 荷载共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度,逆转录聚合酶链半定量检测 L 型 Ca2+通道（LCC）、兰尼碱受体（RyR）、肌浆网钙泵（SERCA）mRNA 表达,对硝基苯磷酸酯（P-nitrophenyl phosphate,P-NPP）法检测SERCA 活性,免疫组织化学法检测 IP3R 蛋白表达。结果甲状腺素可诱导心肌肥厚、心肌细胞结构改变及纤维组织增生,甲状腺素组细胞内钙离子浓度明显高于对照组,分别为（576.2±41.7）nmol/L比（314.6±35.6）nmol/L（P＜0.01）;甲状腺素组 RyR mRNA、SERCA mRNA 及 IP3R 蛋白较对照组表达上调,分别为1.19±0.21比0.73±0.15（P＜0.01）、1.01±0.08比0.76±0.09（P＜0.01）、65.3±13.7比47.9±10.2（P＜0.01）;LCC mRNA 表达和 SERCA 活力降低,分别为0.48±0.11比0.75±0.16（P＜0.01）、（0.062±0.013）μmol·min-1·g-1比（0.133±0.022）μmol·min-1·g-1（P＜0.01）。咪达普利和缬沙坦干预可显著抑制甲状腺素诱导的心肌细胞肥厚,降低细胞内钙离子浓度,咪达普利组和缬沙坦组细胞内钙离子浓度分别为（376.4±32.5）nmo/L 和（392.6±41.2）nmol/L均显著低于甲状腺素组（576.2±41.7）nmol/L（P＜0.01）;咪达普利和缬沙坦干预后 LCC mRNA 表达高于甲状腺素组,分别为0.68±0.14比0.48±0.11（P＜0.01）、0.64±0.13比0.48±0.11（P＜0.01）;咪达普利和缬沙坦干预增加 SERCA 的活力,分别为（0.115±0.019）μmol·min-1·g-1比甲状腺素组（0.062±0.013）μmol·min-1·g-1（P＜0.01）、（0.109±0.015）μmol·min-1·g-1比甲状腺素组（0.062±0.013）μmol·min-1·g-1（P＜0.01）,但对 RyR mRNA、SERCA mRNA 及 IP3R 蛋白表达无影响。结论 RAS 和细胞内钙超载可能参与甲状腺素性心肌肥厚的发病机制,SERCA 活力降低可能是导致甲状腺素性肥厚心肌细胞内钙超载的重要因素。咪达普利和缬沙坦可以改善 L-Thy 诱导的心肌重构和细胞内钙超载并对 SERCA 活力具有保护作用。