内毒素休克大鼠核因子κB活化规律及其在生物蝶呤诱生中的作用

摘要

目的观察内毒素休克大鼠血浆及主要脏器核因子（NF）κB活化规律及其对生物蝶呤（BH4）和一氧化氮（NO）表达水平的影响,探讨内毒素休克时NF-κB信号通路对BH4诱生NO的分子调控机制及其与多器官功能损害的关系。方法将47只大鼠按表格随机法分为正常组（8只）、内毒素／脂多糖（LPS）组（24只,每观察时相点8只,均同时注射LPS制成休克模型）和拮抗组[15只,每观察时相点5只,均同时注射LPS并以吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）拮抗]。休克及拮抗组于注射LPS后2、6、12 h观察,并与正常组同法处死,无菌留取大鼠血标本及肝、肺、肾组织,测定组织中NF-κB活性和三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ（GTP-CHⅠ）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达水平、血浆和组织中的BH4含量及NO水平、肝脏和肾脏功能指标、肺组织髓过氧化物酶活性。结果与正常组（例如肺组织中NF-κB活性为26±6）比较,LPS组大鼠组织中NF-κB迅速活化（P＜0．01）,并于注射后2 h达峰值（肺组织中为291±44）;LPS组各组织中GTP-CHⅠ和iNOS mRNA表达、BH4和NO水平也较正常组明显升高（P＜0．05或0．01）,至伤后12 h仍持续较高水平。此外,该组相应器官功能均受到不同程度的损害。应用PDTC的拮抗组大鼠各组织中NF-κB活性均较LPS组有所降低,GTP-CHⅠ、iNOS mRNA表达及BH4、NO水平显著受抑,肝、肺、肾功能明显改善。结论内毒素休克时机体内NF-κB通路高度活化,并对BH4／NO系统具有明显调节效应;可通过下调BH4介导的iNOS的过度活化抑制NF-κB信号途径,从而减轻组织炎性反应,对机体脏器功能起到保护作用。