缺氧对肠上皮细胞缺氧诱导因子1α活化影响的实验研究

摘要

目的了解缺氧对肠上皮细胞缺氧诱导因子1α（HIF-1α）活化的影响。方法将肠上皮细胞分为常氧处理（正常对照）、缺氧（设缺氧1、2、6、12、24 h）及缺氧+寡霉素处理（分别用浓度为5、10、20、40μg/mL寡霉素处理1 h,再缺氧6 h）。采用蛋白质印迹法检测HIF-1α蛋白表达,免疫荧光法观察HIF-1α向细胞核转位的情况。结果与正常对照（0.08±0.07）相比较,缺氧1 h肠上皮细胞HIF-1α蛋白表达（0.52±0.30）即显著升高（P＜0.05）,6 h达峰值（2.37±1.08,P＜0.05）,同时HIF-1α向细胞核转位也明显增加。寡霉素呈剂量依赖性地抑制缺氧引起的肠上皮细胞HIF-1α蛋白表达增加,用5、10、20及40μg/mL寡霉素处理的缺氧肠上皮细胞HIF-1α蛋白表达量分别为1.62±0.96、1.48±0.56、1.08±0.36及0.58±0.11,均较单纯缺氧6 h（2.67±1.38）显著降低（P＜0.05）,HIF-1α向细胞核转位也被抑制。结论呼吸链抑制剂寡霉素可抑制缺氧肠上皮细胞HIF-1α活化,线粒体呼吸链可能在其发生机制中具有重要作用。