金黄色葡萄球菌肠毒素B基因的克隆和在大肠杆菌中高效表达

摘要

利用PCR方法从金黄色葡萄球菌TSTw基因组DNA中扩增出约700bp的DNA片段,将之克隆到pGEM-7Zf(+)载体上并转化大肠杆菌DH5α菌株.重组质粒的测序结果表明克隆到了seb基因,它含有717bp(不包括N端81bp的信号肽编码区),其核苷酸序列与文献报道完全一致.将其连接于表达载体7ZTS上,转化到大肠杆菌JM109(DE3)内.表达的SEB占总蛋白33.5%.