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利用长引物嵌套式反向PCR方法克隆雅致枝霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因上游序列

     
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摘要

用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ分别对雅致枝霉As3.2806基因组DNA进行消化,而后在低浓度条件下利用T4DNA连接酶使DNA自身环化.根据已知基因序列,设计一对长度为35nt的长反向引物和两对较短的引物,以基因组连接产物为模板,通过三轮嵌套式PCR反应,获得一长度约为4kb的扩增片段.经序列测定表明得到了Δ6-脂肪酸脱氢酶基因上游序列约为1.3kb,初步序列分析显示该序列为一潜在的启动子序列.

著录项

  • 来源
    《生物工程学报》|2006年第4期|581-586|共6页
  • 作者

    王德培; 孙伟; 李明春; 魏东盛; 张颖慧; 邢来君;

  • 作者单位

    南开大学微生物系、天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津,300071;

    南开大学微生物系、天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津,300071;

    南开大学微生物系、天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津,300071;

    南开大学微生物系、天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津,300071;

    南开大学微生物系、天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津,300071;

    南开大学微生物系、天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津,300071;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 转化及克隆;
  • 关键词

    雅致枝霉; 长引物; 巢式反向PCR; Δ6-脂肪酸脱氢酶;

  • 入库时间 2022-08-18 09:18:10

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