三丁酸甘油酯对产肠毒素大肠杆菌K88诱发的小鼠肠道损伤的缓解作用

摘要

本试验旨在研究三丁酸甘油酯(TB)对产肠毒素大肠杆菌K88(ETEC K88)诱导的小鼠肠道损伤的缓解作用。试验1:选用(20±2)g的BALB/c小鼠50只,随机分为5组,每组10只。各组均饲喂基础饲粮,在第4天对照组腹腔注射0.5 mL无菌磷酸盐缓冲液(PBS),试验组腹腔分别注射浓度为5.5×10^(8)、4.9×10^(7)、4.0×10^(6)、6.5×10^(5) CFU/mL的ETEC K88悬液0.5 mL,连续观察3 d临床症状,统计腹泻率和死亡率,剖检、观察肠道病理变化,确定ETEC K88最佳造模剂量。试验2:选择(20±2)g的BALB/c小鼠105只,随机分为7组,每组3个重复,每个重复5只。空白组、阴性对照组饲喂基础饲粮,阳性对照组饲喂添加0.16%金霉素的饲粮,试验1、2、3、4组分别饲喂添加0.05%、0.10%、0.20%、0.30%TB的饲粮。连续饲喂14 d,在第15天空白组小鼠腹腔注射0.5 mL无菌PBS,阴性对照组、阳性对照组和试验组小鼠按照试验1中确定的最佳造模剂量腹腔注射ETEC K88悬液0.5 mL,继续观察3 d,采血、剖检,检测血清中二胺氧化酶(DAO)活性与内毒素(ET)、C-反应蛋白(CRP)和分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量,制作空肠组织切片,观察肠道组织形态变化。结果显示:小鼠腹腔注射不同浓度ETEC K88悬液后出现不同程度的腹泻和死亡情况,根据腹泻率和死亡率,确定4.9×10^(7) CFU/mL为ETEC K88建立小鼠腹泻模型的最佳剂量。阳性对照组和试验3、4组的平均日增重与空白对照组差异不显著(P0.05)。小鼠的腹泻率表现为阴性对照组(53.33%)>试验1组(33.33%)>阳性对照组(26.67%)=试验2组(26.67%)>试验3组(20.00%)=试验4组(20.00%)>空白对照组(无腹泻发生)。肠道损伤程度:阴性对照组>试验1组>阳性对照组>试验2组>空白对照组>试验4组>试验3组。与阴性对照组相比,各试验组以及阳性对照组小鼠血清CRP、ET含量和DAO活性均有不同程度降低,以试验3组降低幅度最大,其次为试验4组。与阳性对照组相比,试验3、4组小鼠血清CRP、ET含量和DAO活性均有不同程度降低,但差异不显著(P>0.05)。与阴性对照组相比,试验3、4组小鼠血清SIgA含量分别增加了169.00%(P<0.05)、114.33%(P<0.05)。与阳性对照组相比,试验3、4组小鼠血清SIgA含量分别增加了72.81%(P<0.05)和37.69%(P<0.05)。由此得出,在小鼠基础饲粮中添加0.20%或0.30%的TB可以对抗大肠杆菌感染,缓解ETEC K88诱导的肠道损伤,且效果与添加0.16%的金霉素相当。