链球菌蛋白G的结构域重构、表达及鉴定

摘要

链球菌蛋白G(streptococcal protein G,SPG)具有与多种动物IgG结合的特性.本研究对链球菌蛋白G进-生物学分析,设计重组蛋白G的基因序列,构建重组蛋白G的原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达,得到带有GST标签的融合蛋白,通过GST亲和层析纯化蛋白.Western blot结果显示,重组蛋白具备与IgG结合的能力.ELISA测定重组蛋白与牛、山羊、兔、鼠4个物种IgG的亲和力,显示重组蛋白G的亲和力普遍高于商品化链球菌蛋白G.本研究成功重构并表达、纯化了链球菌重组蛋白G,得到其与4个物种抗体IgG的亲和力常数,有助于SPG在其他相关研究中的应用.