新城疫病毒M蛋白247位赖氨酸对其功能的影响

摘要

新城疫病毒(NDV)基质蛋白(M)作为病毒核糖核蛋白复合体与糖蛋白之间的桥梁,协调了病毒粒子的组装过程以驱动病毒的出芽。类似于大多数副黏病毒M蛋白,NDV的M蛋白具有核质穿梭特点,其出入核依赖于自身携带的出核信号(NES)和入核信号(NLS)。通常NLS是一簇多数由碱性氨基酸组成的序列。经对比发现,NDV Herts/33强毒株与La Sota疫苗株M蛋白NLS氨基酸组成存在差异,即247位氨基酸存在赖氨酸(K)/精氨酸(R)替换。为了探究两种NLS对于M蛋白功能有何影响,本试验构建了p3XFLAG-Herts/33-WT-M和p3XFLAG-Herts/33-K247R重组表达真核质粒,并利用Western blot及间接免疫荧光实验检验两种信号在M蛋白入核、出核以及出芽方面的差异。结果显示,R247K突变改变了M蛋白的核质分布,使位于胞质中的M蛋白含量增高,从而提高了病毒样颗粒(VLP)的出芽效率。本研究为M蛋白在NDV出芽中的信号调节机制研究奠定了基础。