孕酮通过ABHD2受体介导的cAMP-PKA信号通路调控精子受精功能的研究

摘要

目的 研究ABHD2在不育症患者精子膜表面的表达差异,探究孕酮是否通过ABHD2调控cAMP-PKA进而影响精子的功能活性.方法 收集男性正常生育组精子、少弱精子组和顶体异常组精子样本(各30例),通过RT-PCR、蛋白Western-Blot印迹等方法分析转录水平及蛋白表达的差异,且采用体外添加孕酮、ABHD2抗体、PKA拟制剂H-89,选择观测正常生育组(对照组)与少弱精子组(实验组)男性精子ABHD2的蛋白表达水平,以及cAMP、PKA浓度等变化.结果 少弱精子组和顶体异常组中ABHD2 mRNA转录水平以及ABHD2蛋白表达水平显著减少,具有统计学意义(F:90.84,P＜0.01);在正常生育组中加入孕酮处理后,ABHD2蛋白水平表达明显增加;而少弱精子组中加入孕酮处理后,与未加孕酮相比,ABHD2蛋白水平表达增加不明显.进一步研究,在正常生育组中加入孕酮(P4)处理后,cAMP、PKA浓度极显著增加(P＜0.01),继续加入ABHD2抗体或PKA拟制剂H89后,cAMP、PKA浓度均显著减少(P＜0.01).结论 临床不育与正常生育男性精子之间ABHD2的转录和表达存在差异,孕酮通过ABHD2受体介导的cAMP-PKA信号通路调控精子受精功能.