干扰长链非编码RNA MNX1-AS1对卵巢癌细胞的干样特性、氧化应激以及线粒体功能损伤的影响

摘要

目的:探讨干扰长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1对卵巢癌细胞的干样特性、氧化应激以及线粒体功能损伤的影响.方法:将KOV3细胞随机分组,进行处理及培养,RT-PCR检测RNA MNX1-AS1的表达,筛选干扰效果最明显的序列;观察干细胞成球情况;免疫印迹检测干细胞标记物蛋白八聚体结合转录因子4(OCT4)、性别决定区Y框蛋白(SOX2)和ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达;检测氧化应激标记物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;荧光探针检测活性氧(ROS)的含量;流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化;免疫印迹检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化胱天蛋白酶3(cleaved cas3)/cas3、c-Myc的表达.结果:3个序列对比显示MNX1-AS1-shRNA3干扰组最为显著,选择此组为后续实验干扰组,分组为对照组、阴性对照组(shRNA-NC)、干扰组(MNX1-AS1-shRNA3);与对照组相比,MNX1-AS1-shRNA3干扰组SKOV3干细胞成球数量、直径减小,干细胞标记物蛋白OCT4、SOX2、ABCG2的表达显著降低,SOD活性、c-Myc蛋白表达均显著降低,线粒体损伤标记物蛋白的表达(Bax/Bcl-2、cleaved cas3/cas3)、MDA与ROS含量均显著升高,线粒体的膜电位下降.结论:干扰lncRNA MNX1-AS1诱导卵巢癌细胞的干样特性降低、氧化应激增强、线粒体损伤加重,干扰lncRNA MNX1-AS1对SKOV3细胞抑制效果显著,具有靶向治疗卵巢癌的潜力.