白藜芦醇对过氧化氢诱导滑膜细胞凋亡的作用及机制

摘要

目的:研究白藜芦醇(RES)对过氧化氢(H2O2)处理的大鼠佐剂性关节炎(AA)成纤维样滑膜细胞(FLS)凋亡的影响,并探讨Fox基因在其中的作用.方法:采用足趾皮下注射弗氏完全佐剂诱导SD大鼠AA模型,26 d成模后,取致炎侧踝关节滑膜组织,应用组织块培养法培养FLS,取第3代FLS用于实验,首先采用CCK-8法观察不同浓度的H2 O2对FLS增殖的影响,Annexin V-FITC-PI流式细胞术检测不同浓度的白藜芦醇对H2 O2(20μmol/L)处理的FLS细胞凋亡率;RT-PCR检测各组FLS中FoxO1、FoxO4基因水平的表达,免疫印迹检测FLS中Bcl-2、Bax蛋白表达情况.结果:H2 O2(≤20μmol/L)在一定浓度范围内,促进FLS生长;当H2 O2 (＞20 μmol/L)增加时,H2 O2诱导的FLS凋亡数明显增高;随着白藜芦醇浓度的升高,FLS的细胞凋亡率明显升高,白藜芦醇明显降低FoxO1、FoxO4基因水平的表达,增加了细胞内Bcl-2蛋白表达,抑制细胞内Bax表达.结论:白藜芦醇可通过下调FoxO1、FoxO4基因表达,上调抗凋亡Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白的表达,诱导滑膜细胞的凋亡.