稳定表达淀粉酶的啤酒酵母工程菌的构建

摘要

从酵母菌整合载体YIp5出发, 借助质粒pBluescriptM13-,以酵母的乙酰乳酸合成酶基因(ILV2)为同源重组序列, 构建了含α-淀粉酶基因(AMY)的重组整合质粒pMGI3.用pMGI3所含AMY+ILV2嵌合基因片段转化工业啤酒酵母菌J1, AMY基因表达框整合在酵母染色体的ILV2基因簇上,转化子(JA3)不含细菌载体序列和酵母抗药性选择标记.JA3表达α-淀粉酶活性为4.8U ml-1,并使麦芽汁发酵液的双乙酰含量降低60%.JA3的遗传稳定性为100%, 可以比较安全地用于啤酒生产.