冬虫夏草对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞色素上皮衍生因子和血管内皮生长因子表达的影响

摘要

目的观察冬虫夏草对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞色素上皮衍生因子（PEDF）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨其肾脏保护的作用机制。方法 35只8周龄清洁级雄性SD大鼠,体重260～280 g,根据体重按随机数字表法分为正常血清组（n=18）、低剂量虫草提取液喂养组(5g·kg-1·d-1,n=8)和高剂量虫草提取液喂养组(10 g·kg-1·d-1,n=9),采用生理盐水及不同剂量虫草提取液灌胃8d后,分离静脉血提取对照血清及不同浓度的冬虫夏草含中药血清。体外培养HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,之后分别加入正常血糖正常血清[正常血糖组（NC组）:5.6 mmol/L葡萄糖+10%胎牛血清（FBS）+1%正常大鼠血清]、高血糖正常血清[高血糖组（HG组）:30.0 mmol/L葡萄糖+10%FBS+1%正常大鼠血清]、低剂量虫草含药血清[低药组（LD）:30.0 mmol/L葡萄糖+10%FBS+1%低剂量虫草含药血清]和高剂量虫草含药血清[高药组（HD）:30.0 mmol/L葡萄糖+10%FBS+1%高剂量虫草含药血清]进行培养,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定各组细胞PEDF及VEGF mRNA的表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组细胞上清液中PEDF及VEGF的水平。组间资料比较采用单因素方差分析,样本间资料比较采用t检验。结果与NC组相比,HG组PEDF mRNA表达明显下降（24h:0.375±0.011比0.507±0.008,t=16.828,P＜0.01;72 h:0.376±0.014比0.515±0.010,t=14.034,P＜0.01）,VEGF mRNA表达明显上升（24 h:1.005±0.011比0.864±0.012,t=14.963,P＜0.01;72 h:1.168±0.012比0.873±0.011,t=31.417,P＜0.01）;LD组和HD组PEDF mRNA表达较HG组显著上调（24 h:0.505±0.018、0.639±0.012比0.375±0.011,F=354.719,P＜0.01;72 h:0.612±0.023、0.700±0.019比0.376±0.014,F=97.82,P＜0.01）,VEGF mRNA表达明显下降（24 h:0.838±0.014、0.767±0.017比1.005±0.011,F=79.55,P＜0.01:72 h:0.923±0.016、0.784±0.012比1.168±0.012,F=244.28,P＜0.01）,且HD组疗效更明显。经对照血清及CS血清培养24、72 h后,与NC组相比,HG组PDEF水平明显降低[24 h:（267±8）比（303±10）ng/L,t=6.493,P＜0.01;72 h:（265±27）比（338±42）ng/L,t=3.259,P＜0.01],VEGF明显升高[24 h:（128±3）比（113±8）ng/L,t=3.737,P＜0.01;72 h:（144±7）比（125±7）ng/L,t=4.215,P＜0.01];与HG组相比,LD组和HD组PEDF明显升高[24h:（297±12）、（296±26）比（267±8）ng/L,F=5.427,P＜0.01;72 h:（323±20）、（332±33）比（265±27）ng/L,F=5.690,P＜0.01],VEGF明显降低[24 h:（106±6）、（109±11）比（128±3）ng/L,F=5.738,P＜0.01;72 h:（124±9）、（125±7）比（144±7）ng/L,F=7.878,P＜0.01]。结论冬虫夏草可能通过降低肾小球系膜细胞VEGF的表达,升高PEDF的表达,对肾脏起到保护作用。