生长激素释放肽对全脑缺血/再灌注损伤大鼠海马组织的保护作用及对谷氨酸/γ-氨基丁酸敏感神经元放电活动的影响

摘要

目的探讨生长激素释放肽（Ghrelin）对全脑缺血/再灌注（I/R）大鼠海马神经元的保护效应及其作用机制。方法按随机数字表法将雄性SD大鼠分为假手术（Sham）组、I/R组、生理盐水（NS）+I/R组和Ghrelin+I/R组,每组42只。夹闭双侧颈内动脉15 min、再灌注60 min制备全脑I/R模型;Sham组仅暴露颈动脉,不做任何处理。Ghrelin+I/R组、NS+I/R组于I/R前经侧脑室注射Ghrelin或NS 1μL。实验结束后取部分大鼠脑组织,采用化学比色法测定海马组织丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）和谷胱甘肽（GSH）水平,测量梗死面积,观察组织病理学改变。其余大鼠采用单细胞外记录神经元放电方法,分别观察海马CA1区谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）敏感神经元（Glu-N、GABA-N）的放电活动。结果与Sham组比较,I/R模型大鼠海马组织MDA、MPO显著增高,GSH显著降低,海马组织梗死面积明显增加,固缩神经元细胞数明显增多;而NS+I/R组与I/R组各指标比较差异均无统计学意义。与NS+I/R组比较,Ghrelin+I/R组海马组织MDA、MPO显著降低[MDA（nmol/g）:16.4±4.2比24.5±6.7,MPO（nmol/g）:6.4±1.8比10.2±2.9,均P＜0.05],GSH显著升高（μmol/g:2.65±0.72比1.66±0.50,P＜0.05）,海马组织梗死面积明显缩小[（43.9±9.5）%比（77.0±12.7）%,P＜0.01],固缩神经元细胞数明显减少(个:36.2±4.5比47.1±6.1,P＜0.01。电生理研究结果显示,I/R模型大鼠海马CA1区Glu-N和GABA-N放电频率较Sham组明显增加;NS+I/R组Glu-N和GABA-N放电活动与I/R组比较差异无统计学意义。与NS+I/R组比较,Ghrelin+I/R组海马CA1区Glu-N放电频率（Hz）显著降低（缺血时:3.81±0.67比4.98±0.33,再灌注时:3.01±0.37比3.77±0.41,均P＜0.05）,GABA-N放电频率（Hz）显著增加(缺血时:5.62±0.54比3.62±0.39,再灌注时:4.81±0.48比3.71±0.21,均P＜0.05。结论在I/R损伤过程中,Ghrelin对海马组织可能具有神经元保护效应,该效应可能与降低神经元兴奋性有关。