补益脾肾法针刺对佐剂性关节炎大鼠炎性因子和软骨基质的影响

摘要

目的:观察补益脾肾法针刺对佐剂性关节炎(AA)大鼠血清炎性因子和滑膜软骨基质的影响,探讨针刺治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制。方法:将60只雄性清洁级Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、雷公藤多苷片组、针刺组,每组15只。模型组、雷公藤多苷片组、针刺组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)诱导AA模型。雷公藤多苷片组按8 mg/kg剂量灌胃雷公藤多苷片混悬液;针刺组针刺“肾俞”“脾俞”及右侧“后三里”“三阴交”“阳陵泉”,每次15 min,均每天干预1次,共干预15 d。计算各组大鼠造模前及干预前后足跖肿胀度,干预前后关节炎指数(AI)评分;ELISA法检测大鼠血清白介素(IL)-1β、IL-4、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;透射电镜和HE染色法观察大鼠滑膜组织超微结构及形态学改变;免疫组化法观察大鼠滑膜组织基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9阳性表达。结果:干预前模型组、雷公藤多苷片组及针刺组大鼠足跖肿胀度高于正常组(P<0.01);干预后,模型组大鼠足跖肿胀度及AI评分高于正常组(P<0.01),雷公藤多苷片组、针刺组大鼠足跖肿胀度、AI评分低于模型组(P<0.05),针刺组大鼠足跖肿胀度、AI评分低于雷公藤多苷片组(P<0.05)。模型组大鼠滑膜细胞核膜不清晰,染色质固缩,滑膜组织出现大量炎性细胞浸润和增生;雷公藤多苷片组、针刺组大鼠滑膜细胞核膜较清晰光滑、核染色质固缩不明显,滑膜组织炎性细胞浸润和增生减轻;针刺组大鼠滑膜组织基质破坏减少。与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α水平及滑膜组织MMP-3、MMP-9阳性表达升高(P<0.01),IL-4、IL-10水平降低(P<0.01);与模型组比较,雷公藤多苷片组和针刺组大鼠血清IL-1β、TNF-α水平及滑膜组织MMP-3、MMP-9阳性表达降低(P<0.05,P<0.01),IL-4、IL-10水平升高(P<0.05);与雷公藤多苷片组比较,针刺组大鼠血清TNF-α水平及滑膜组织MMP-3、MMP-9阳性表达降低(P<0.05),IL-4、IL-10水平升高(P<0.05)。结论:补益脾肾法针刺可有效改善AA大鼠关节软骨损伤,其机制可能与减轻滑膜炎性反应及抑制关节软骨基质降解有关。