基于肠道菌群探讨艾灸“命门”“关元”对健康大鼠免疫功能的影响

摘要

目的:观察艾灸“命门”“关元”对健康大鼠免疫功能、肠道菌群的影响,探讨艾灸调节免疫功能的作用机制。方法:将20只8周龄SD大鼠随机分为青幼年空白组和青幼年艾灸组,每组10只;将20只8月龄SD大鼠随机分为中年空白组和中年艾灸组,每组10只。2个艾灸组大鼠予艾灸“命门”“关元”,每次15 min,每日1次,每周5次,共4个月;2个空白组正常饲养。干预结束后,计算大鼠胸腺、脾脏指数;采用HE染色法观察大鼠胸腺、脾脏组织形态;采用流式细胞术检测大鼠T淋巴细胞亚群CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)表达并计算CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)值;采用ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)含量;采用16S rRNA高通量测序技术检测大鼠肠道菌群。分析肠道菌群相对丰度与血清TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-17含量的相关性。结果:与青幼年空白组比较,青幼年艾灸组胸腺组织皮质面积增加,且淋巴细胞排列更紧密;与中年空白组比较,中年艾灸组大鼠胸腺指数增加(P0.05)。2个艾灸组CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)表达及CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)值与同年龄段空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与青幼年空白组比较,青幼年艾灸组IL-6含量升高(P<0.05);与中年空白组比较,中年艾灸组IL-10、IL-17含量降低(P<0.05)。与青幼年空白组比较,青幼年艾灸组Sobs指数、Ace指数、Chao指数升高(P<0.01,P<0.05),螺旋体门、密螺旋体属、苏黎世杆菌属、理研菌科RC9肠道群相对丰度升高(P<0.05),杜氏乳杆菌属相对丰度降低(P<0.05);与中年空白组比较,中年艾灸组大鼠螺旋体门、密螺旋体属、未分类的消化球菌属相对丰度升高(P<0.05),变形菌门、异杆菌属、粪杆菌属相对丰度降低(P<0.05)。嗜木聚糖真杆菌属、未分类的毛螺菌属相对丰度与血清TNF-α含量呈负相关(r=-0.39,P=0.03;r=-0.24,P=0.04),梭状芽孢杆菌-UCG014属、乳杆菌属相对丰度与血清TNF-α含量呈正相关(r=0.37,P=0.04;r=0.43,P=0.02);罗氏菌属和果胶单核菌相对丰度与血清IFN-γ含量呈负相关(r=-0.40,P=0.02;r=-0.44,P=0.01);乳杆菌属相对丰度与血清IL-10含量呈正相关(r=0.43,P=0.02)。结论:艾灸可改善健康大鼠免疫功能,其机制可能与调节肠道菌群相对丰度有关。