HILIC B柱-HPLC法测定注射用门冬氨酸鸟氨酸的有关物质

摘要

目的:建立测定注射用门冬氨酸鸟氨酸中有关物质的方法.方法:采用亲水作用色谱B柱-高效液相色谱(HILIC B柱-HPLC)法测定3批注射用门冬氨酸鸟氨酸的有关物质.色谱柱为ACE HILIC B,流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)-乙腈(40:60,V/V),检测波长为205 nm,流速为1.3 mL/min,柱温为30℃.对样品进行酸、碱、光、热、氧化破坏性试验,并将建立的方法与2015年版《中国药典》方法比较.结果:除光照破坏样品外,其余各条件破坏后样品与未破坏样品比较主峰面积均有所下降、杂质增多,各杂质间及与主成分峰间分离度均大于1.5;5个杂质马来酸、精氨酸、富马酸、门冬氨酸缩合物、3-氨基-2-哌啶酮及主成分门冬氨酸鸟氨酸的检测质量浓度线性范围分别为0.0772～7.72、0.464～9.28、0.0876～8.76、0.403～10.075、0.0824～8.24、1.613～80.7μg/mL(r=0.9997～0.9999),检测限分别为0.058、19、2.5、17、0.35、24 ng,定量限分别为0.19、63、8.3、56、1.2、80 ng.5个杂质的平均加样回收率为96.3％～102.1％(RSD=0.4％～2.0％,n=9).3批样品中上述5个杂质的平均含量分别为0(未检出)、0、0.026％、0.011％、0.019％,与《中国药典》方法比较,测定结果相似,但后者进行2次系统适用性试验时各峰出峰顺序不一致.结论:建立的HILIC B柱-HPLC法简便、准确,耐用性和重现性优于《中国药典》方法,可以用于控制注射用门冬氨酸鸟氨酸的有关物质.