RNA干扰对乳腺癌细胞骨桥蛋白基因表达抑制的研究

摘要

目的应用RNA干扰术靶向降低乳腺癌MCF-7细胞中骨桥蛋白基因（OPN）的表达水平，研究OPN基因对乳腺癌细胞增殖和侵袭性等生物学行为的影响。方法将设计合成的骨桥蛋白OPN序列特异性小分子干扰RNA（siRNA），转染乳腺癌细胞株MCF-7，用逆转录PCR和蛋白印记杂交测OPN mRNA及蛋白水平的表达，通过生长曲线、克隆形成实验来检测细胞增殖及侵袭性情况的变化。结果OPN特异性siRNA转染后，骨桥蛋白mRNA及蛋白水平均明显下降，比色法显示转染组72h吸光度值为（0．21±0．06）与空白对照组（1．18土0．05）相比较明显受到抑制。转染组细胞克隆形成数为3．8个，较空白对照组（7．3个）及阴性对照组（7．1个）明显下降（P〈0．05）。结论乳腺癌MCF-7细胞中，针对OPN合成的siRNA能够有效地抑制骨桥蛋白的表达，从而显著抑制细胞的增殖和侵袭能力。