犬肾上皮细胞对泊那替尼纳米混悬剂的摄取机制研究

摘要

目的 探讨犬肾上皮细胞（MDCK细胞）对泊那替尼纳米混悬剂的摄取机制.方法 采用溶剂蒸发法制备泊那替尼纳米混悬剂.高效液相法检测泊那替尼,评估其专属性、精密度及泊那替尼回收率;检测多药耐药蛋白（MDR）1抑制剂凡德他尼对泊那替尼纳米混悬剂细胞毒性作用的影响;采用高效液相法检测表面活性剂和凡德他尼对MDCK细胞摄取泊那替尼能力的影响.结果 采用高效液相法检测泊那替尼时,细胞溶液对检测无干扰,专属性强;日内和日间相对标准偏差分别为0.9％、1.2％,精密度良好;50、100、200 mg/L泊那替尼标准品回收率分别为101.7％、98.2％、102.4％,回收率高.细胞毒性实验结果表明细胞存活率随着泊那替尼纳米混悬剂浓度增加而降低;各泊那替尼浓度下,细胞存活率均随凡德他尼浓度增加而降低.MDCK细胞对泊那替尼摄取量随泊那替尼纳米混悬剂浓度的增加呈非线性增加.不同泊那替尼浓度下,MDCK细胞对含有表面活性剂的泊那替尼纳米混悬剂中泊那替尼的摄取量均高于对原料药中泊那替尼的摄取量[10 mg/L：（5.2±1.3） μg/mg蛋白比（3.0±0.8）μg/mg蛋白,20 mg/L：（6.6±2.3）μg/mg蛋白比（4.1±1.9） μg/mg蛋白,50 mg/L：（19.1±1.6） μg/mg蛋白比（7.3±1.7） μg/mg蛋白,100 mg/L：（30.3±1.0）μg/mg蛋白比（17.9±1.8） μg/mg蛋白,200 mg/L：（70.7±4.2）μg/mg蛋白比（53.6±5.3） μg/mg蛋白,400 mg/L：（94.7±3.4） μg/mg蛋白比（82.6 ±4.2）μg/mg蛋白]（P＜0.05）.4 mg/L和8 mg/L凡德他尼可明显增加细胞对泊那替尼纳米混悬剂中泊那替尼的摄取量[（4.65±0.11）、（5.70±0.24） μg/mg蛋白比（3.21±0.16） μg/mg蛋白,P＜0.05、P＜0.01].结论 MDCK细胞对泊那替尼纳米混悬剂的摄取可能受MDR1的介导.