应用时间分辨荧光免疫层析技术建立血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ)定量检测的方法

摘要

目的:建立一种血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,ATⅡ)的定量检测方法,并检验该方法的性能。方法:通过以时间分辨荧光纳米微球作为荧光标记物,结合双抗体夹心法原理和免疫层析技术,实现ATⅡ的定量检测。结果:工艺条件优化结果显示,T线包被浓度为1.0mg/mL、结合物稀释比例为6倍、检测时间为5min时,曲线梯度和线性最好。检测方法在5~700ng/L范围内线性关系良好,方程为y=10.226x–9.1429,R^(2)=0.9989,批内精密度CV≤2.90%,批间精密度CV≤4.90%,最低检测限为1.36ng/L,准确度检测相对偏差在±1.40%范围内,检测方法具有良好的分析特异性,交叉反应因子不会影响检测结果。测定血清样本中的ATⅡ浓度,与已上市化学发光法检测试剂盒检测结果相关性较好,二者的阳性符合率与阴性符合率分别为96.67%和98.18%,假阳性率和假阴性率分别为2.22%和2.73%,诊断符合率为97.50%。结论:研究建立的ATⅡ定量检测方法具有操作简单、检测快速、结果准确的优点。