Generation and selection of immunized Fab phage display library against human B cell lymphoma

摘要

与 B 房间淋巴瘤在病人的管理把单音的同种细胞的抗体用作指向的治疗的赞同为这组病人导致了新治疗选择。由传统的 hybridoma 技术的单音的同种细胞的抗体的生产是昂贵的，并且结果鼠科的抗体经常有触发人的反老鼠抗体(HAMA ) 反应的劣势。因此，噬菌体产生的重组体 Fab 抗体显示技术能是在管理 B 房间淋巴瘤的一种合适的选择。在这研究，我们从与人的 B 淋巴瘤房间使免疫的 BALB/c 老鼠的怒气房间提取了全部的 RNA，并且使用了 RT-PCR 为 kappa 光链和重链的 Fd 碎片放大 cDNAscoding。在适当限制文摘以后，这些 cDNA 碎片连续地被插入到噬菌体构造一个使免疫的 Fab 噬菌体显示图书馆的中间的向量 pComb3H-SS。构造图书馆的差异是近似 1.94x10 (7 ) 。跟随五轮简历 panning，可溶的 Fab 抗体从 ELISA 识别的积极克隆被生产。从八积极克隆， FabC06， FabC21， FabC43 andFabC59 为顺序分析被选择。在氨基酸顺序的水平，可变的重域(V (H)) 和可变的轻域(V (L)) 被发现分享 88-92% 和 89-94% 相同，序列分别地由相应鼠科的细菌行基因编码了。而且，有 B 房间淋巴瘤的膜蛋白质的反应被 immunohistochemistryand 表明西方的弄污。这些使免疫的 Fab 抗体可以为 B 房间淋巴瘤的进一步的学习提供一个珍贵工具并且能也贡献疾病治疗的改进。