沙雷氏菌(Serratia marcescens)Yj1的分离鉴定及菌体有机磷降解酶的分离纯化

摘要

从大豆土壤中分离纯化得到一株具有卵磷脂和乐果降解能力的菌株Yj1,对该菌株进行鉴定、生长条件优化、酶活性鉴定以及有机磷降解酶的分离纯化.结果表明,Yj1与Serratia marcescens WW4(CP003959.1)的16S rDNA相似度为99％.正交试验对所需培养基进行优化,得到该菌株的最佳生长条件为甘露糖、蛋白胨和pH 8的组合.Yj1菌株在两种磷源条件下,菌株生长量均很低,但72 h内以大豆卵磷脂为磷源时的菌体生长情况优于乐果.以大豆卵磷脂为磷源时酸性磷酸酶、碱性磷酸酶与有机磷降解酶活性明显高于以乐果为磷源时的酶活,且72 h内碱性磷酸酶活性一直都高于酸性磷酸酶和有机磷降解酶.硫酸铵沉淀法结合阳离子交换层析成功从Yj1菌体中分离纯化了有机磷降解酶,SDS-PAGE结果显示纯化的蛋白为单一条带.且阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸氨沉淀的5.303倍,硫酸氨沉淀为粗酶的1.416倍.