右美托咪定在体外对原代海马神经元氧化应激损伤的影响

摘要

目的 探讨右美托咪定在体外减弱原代海马神经元的氧化应激损伤的机制.方法 将培养的原代海马神经元分为5组:空白对照组(C组)、损伤对照组(S组)、右美托咪定组(D组),D1,D2,D3组加入不同剂量的右美托咪定(0.001μmol/L、0.1μmol/L、10μmol/L).利用1 mmol/L的过氧化氢(H2O2)处理原代海马神经元1 h,制作神经元氧化应激损伤模型.按照以上分组情况加入右美托咪定,37°C、5％二氧化碳孵箱孵育6 h.通过测定细胞存活率和上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性确定减轻海马神经元损伤的右美托咪定的适宜浓度.并检测细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测量各组细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和脑源性神经营养因子(BNDF)mRNA表达量.结果 右美托咪定组(0.001μmol/L、0.1μmol/L、10μmol/L)细胞存活率分别为(72.13±2.45)％、(89.34±2.56)％、(78.40±2.60)％,均高于损伤组的(51.04±2.12)％,差异有统计学意义(P<0.05);LDH活性显著低于损伤对照组;0.1μmol/L右美托咪定组对海马神经细胞氧化应激损伤的保护作用最好.0.1μmol/L右美托咪定组海马神经细胞培养上清液中MDA含量及细胞凋亡率显著低于损伤对照组,SOD活性显著高于损伤对照组.RT-PCR法检测结果提示0.1μmol/L右美托咪定组ERK1/2和BNDF mRNA表达量显著高于损伤对照组.结论 适宜剂量的右美托咪定对氧化应激损伤的海马神经元有一定的保护作用,其作用机制可能与其能够提升海马神经细胞的抗氧化能力,从而抑制海马神经元的凋亡有关,这种功能可能与ERK1/2和BNDF信号通路有关.