调神通络针刺法通过Nrf2/ROS通路对脑卒中后痉挛大鼠神经功能、肌张力及神经递质的影响

摘要

目的:观察调神通络针刺法通过核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/活性氧(ROS)通路对脑卒中后痉挛大鼠神经功能、肌张力及神经递质的影响,探讨其作用机制。方法:SD大鼠分为假手术组、模型组、西药组、非穴位针刺组、调神通络针刺组、调神通络针刺+ML385组,每组15只。采用大脑中动脉栓塞法制备脑卒中后痉挛大鼠模型。造模后,西药组大鼠给予巴氯芬灌胃(0.4mg/kg);非穴位针刺组选择大鼠患侧肋下髂嵴上10mm的固定点进行针刺;调神通络针刺组于顶中线、右侧顶旁线给予调神通络法针刺;调神通络针刺+ML385组大鼠在行调神通络针刺前30min按30mg/kg剂量给予腹腔注射Nrf2抑制剂ML385。针刺干预均每次10min,每日1次,各组均干预7d。用神经功能缺损评分和改良Ashworth量表(MAS)评分评估大鼠神经功能和痉挛程度;电生理记录仪检测大鼠肌张力和H反射;用TTC染色法测定大鼠脑梗死体积百分比;用高效毛细管电泳法检测大鼠大脑皮层梗死区组织氨基酸类神经递质γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)、谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)含量;荧光分光光度法检测大脑皮层梗死区组织单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量;二氢乙锭染色检测大鼠大脑皮层梗死区组织ROS水平;Westernblot法检测大鼠大脑皮层梗死区组织Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、MAS评分、Hmax/Mmax比值、脑梗死体积百分比、Glu含量、Asp含量、ROS水平均升高(P<0.001),肌肉反应对张力传感器的作用力、诱发H反射的刺激阈值,GABA、Gly、5-HT、DA、NE含量及Nrf2、HO-1蛋白表达水平均降低(P<0.001);与模型组比较,非穴位针刺组各指标差异均无统计学意义;与模型组、非穴位针刺组比较,西药组、调神通络针刺组大鼠神经功能缺损评分、MAS评分、Hmax/Mmax比值、脑梗死体积百分比、Glu含量、Asp含量、ROS水平均降低(P<0.001),肌肉反应对张力传感器的作用力、诱发H反射的刺激阈值,GABA、Gly、5-HT、DA、NE含量及Nrf2、HO-1蛋白表达水平均升高(P<0.001,P<0.01);与调神通络针刺组比较,调神通络针刺+ML385组大鼠神经功能缺损评分、MAS评分、Hmax/Mmax比值、脑梗死体积百分比、Glu含量、Asp含量、ROS水平均升高(P<0.001,P<0.05),肌肉反应对张力传感器的作用力、诱发H反射的刺激阈值,GABA、Gly、5-HT、DA、NE含量及Nrf2、HO-1蛋白表达水平均降低(P<0.001,P<0.05,P<0.01)。结论:调神通络针刺法可通过激活Nrf2/ROS通路,调节皮层梗死区神经递质含量,从而改善脑卒中后痉挛大鼠神经功能损伤和肌肉痉挛。