芍药苷-6-O'-苯磺酸酯对摄取性转运蛋白表达的影响

摘要

目的 研究芍药苷-6-O'-苯磺酸酯(CP-25)对摄取性转运蛋白在大鼠成纤维样滑膜细胞(Rat-FLS)中表达的影响.方法 体外分离培养Rat-FLS并通过倒置显微镜观察细胞状态;流式细胞术和CCK-8法分别用于检测Rat-FLS的纯度和生长曲线;qRT-PCR检测CP-25对Rat-FLS中转运蛋白mRNA水平的影响;Western blot检测CP-25对Rat-FLS中转运蛋白表达的影响.结果 从大鼠滑膜组织中分离培养的Rat-FLS增殖活跃、生长情况良好;流式细胞术结果显示Rat-FLS纯度高达96％以上;CCK-8结果显示1～7d的Rat-FLS具有较好的增殖活性;qRT-PCR结果显示10μmol/L CP-25能上调有机阴离子转运蛋白(OAT) 1/3、有机阳离子转运蛋白(OCT) 1/3、葡萄糖转运蛋白(GLUT)4、寡肽转运蛋白(PEPT)1的mRNA水平,同时CP-25能下调GLUT1和单羧酸盐转运蛋白(MCT)1/2的mRNA水平;Western blot结果显示CP-25能上调转运蛋白OAT1/3、OCT1/3、GLUT4、PEPT1的蛋白表达,同时CP-25能下调转运蛋白GLUT1和MCT1/2的蛋白表达.结论 CP-25能不同程度地调节摄取性转运蛋白,为研究CP-25与其他药物之间的相互作用提供了参考.