类产碱假单胞菌杀虫蛋白的N端鉴定及抗体制备

摘要

@@ 细菌杀虫毒素蛋白是一类具有专一性杀虫活性的毒素蛋白,在生物防治领域具有潜在的应用价值.目前发现的细菌杀虫毒素蛋白的种类仍十分有限,主要集中于芽孢杆菌属(Bacillus),如苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)[1]、球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)[2].已从这些细菌菌株中分离或鉴定了多种杀虫毒素蛋白,其中仅在苏云金芽孢杆菌的各种菌株中就已发现上百种杀虫晶体蛋白,其杀虫机制也得广泛而深入的研究[3].最近的研究表明,从自然罹病死亡的蝗虫体内分离出的一株类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)也存在一种对昆虫有致毒作用的毒素蛋白,利用该菌发酵液进行毒力实验,发现对蝗虫有一定的杀虫活力[4,5].进一步研究表明,该杀虫毒素蛋白的分子量较低,为一种外毒素蛋白[6].为了阐明这种杀虫蛋白的分子本质和基因序列,进而揭示该杀虫蛋白的杀虫机制,我们从类产碱假单胞菌培养液中分离纯化出杀虫蛋白,并利用纯化杀虫蛋白进行N端序列测定及抗体制备,为杀虫蛋白的基因克隆奠定了基础.