产气肠杆菌EAM-Z1尿苷磷酸化酶的分离纯化及性质研究

摘要

从产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)突变株EAM-Z1中分离出一种具有较高转移酶活性的尿苷磷酸化酶(UPase).经测定这种Upase的分子量为12.8×104,亚基分子量为4.3×104,由3个同型亚基组成.N端氨基酸序列为:MRMVDLIATKRDGGE.等电点为4.46.对尿苷的Km为0.29mmol/L.酶反应的最适pH为7.8,最适温度为50℃.该酶能磷酸化尿苷、胸苷、5-氟尿苷、2′-脱氧-5-氟尿苷及尿嘧啶-β-D-阿拉伯呋喃糖,且具有较高的转移酶活性,能将尿苷和5-氟尿嘧啶转化成5-氟尿苷(一种抗癌药物的中间体),其转化率为47%.该酶的这些特性对于酶法合成核苷类抗肿瘤药物和抗病毒药物是十分有用的.