解淀粉芽孢杆菌杀线虫活性高效筛选模型的建立及应用

摘要

[目的]食线虫细菌对线虫的侵染机制报道甚少,限制了生防细菌的在农业实践中的广泛应用.本研究中,我们构建了一种对细菌杀线虫活性进行快速高效筛选的方法来快速寻找与线虫侵染功能相关的基因.[方法]将培养在固体平板上的野生型解淀粉芽孢杆菌FZB42及其突变株接种于5mL液体快杀培养基中,37℃培养24h后,在24孔板中分别加入200μL菌液和50-60条LA龄秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans),记录变化明显的时间点及线虫存活数,将相对于原始菌株杀线虫能力明显下降的突变株选出,并进行多次复筛.同时以传统的固体平板杀线虫法作为对照.[结果]用液体快杀法在21h时筛选出了与原始菌株相比杀线虫活性显著下降的2株突变株F1和F2,与传统的固体平板杀线虫法结果一致,且极大地缩短了筛选时间.[结论]该研究为下一步鉴定食线虫细菌中的毒力基因、进而阐明病原细菌侵染宿主的分子机制提供了良好的生物材料,并缩短了研究周期.