miR-219a-5p通过下调KLF4减轻H_(2)O_(2)诱导的人心肌细胞氧化损伤

摘要

目的探究miR-219a-5p对人心肌细胞(HCM)氧化应激损伤的作用和机制。方法利用H_(2)O_(2)建立HCM氧化应激模型,将HCM细胞随机分成4组:对照组、H_(2)O_(2)组(200μmol/L H_(2)O_(2)处理6 h),H_(2)O_(2)+NC mimic组(H_(2)O_(2)处理前转染对照mimic)和H_(2)O_(2)+miR-219a-5p组(H_(2)O_(2)处理前转染miR-219a-5p mimic)。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Real-time PCR检测miR-219a-5p和KLF4 mRNA表达,Western blot检测Bax、Bcl-2和Krüppel样因子4(KLF4)蛋白表达,试剂盒检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。另外,利用荧光素酶报告基因实验确证miR-219a-5p与KLF4的相互作用关系。结果与对照组相比,H_(2)O_(2)组中miR-219a-5p表达、细胞活力和SOD水平降低,细胞凋亡、Bax/Bcl-2、ROS和MDA水平以及KLF4表达升高(均P0.05)。荧光素酶实验结果显示,miR-219a-5p能够降低KLF4-野生型质粒的荧光素酶活性(P<0.05)。结论miR-219a-5p对H_(2)O_(2)诱导的HCM细胞氧化应激损伤具有缓解作用,这种作用可能是通过下调KLF4的表达发挥的。