野生大豆胁迫应答膜联蛋白基因的克隆及胁迫耐性分析

摘要

野生大豆对非生物胁迫具有优良的抗性,是研究胁迫机制、挖掘抗性基因的理想材料.以耐盐野生大豆为试材,利用前期获得的盐胁迫基因芯片杂交结果和EST数据库,筛选出1个响应胁迫的3ˊ-EST,序列分析表明,该EST编码膜联蛋(annexin,ANN).通过改进的5ˊ-RACE获得了该基因的完整编码区,翻译产物与拟南芥膜联蛋白的相似性为57%,将该基因命名为GsANN.GsANN基因的翻译产物具有膜联蛋白家族特征性的结构域,无强烈的亲水,疏水性,无信号肽,无跨膜结构域,与已报道的植物ANN蛋白一致.亚细胞定位结果表明GsANN蛋白在细胞内聚集于质膜附近.GsANN基因在野生大豆叶中受盐及干旱胁迫的诱导,超量表达GsANN基因的拟南芥对盐胁迫和干旱胁迫的敏感性提高,揭示了该基因与植物抗性间的关系.