影响基因工程猪生长激素复性效率的因素

摘要

对影响基因工程猪生长激素(r-pGH)体外复性效率的因素进行了研究,结果表明:复性液组成、变性剂种类、复性方法的选择、变复性pH对r-pGH体外复性效率有较大影响,β-巯基乙醇、谷光苷肽等添加剂对r-pGH的体外复性影响不显著.提取包含体用6mol/L盐酸胍溶解,空气氧化80h后转入复性缓冲液中开始重组蛋白复性,采用透析复性法--复性缓冲液Ⅲ(0.25%NaHCO3,0.2%α-乳糖,0.2%甘露醇),pH9.0,透析5～6次,可较好地恢复r-pGH生物活性.复性后蛋白浓缩液进行去垂体大鼠试验,大鼠增重明显,表明得到了正确折叠的较高生物活性的r-pGH.