前房注射角膜内皮细胞治疗兔大泡性角膜病变的实验研究

摘要

背景大泡性角膜病变是导致角膜盲的主要原因,前房注射有功能的内皮细胞替代病变内皮可以有效解决供体来源缺乏的问题。目的 构建兔保留后弹力层的改良式大泡性角膜病变模型,评价前房注射兔原代角膜内皮细胞的治疗效果。方法 选取2.5~3.0 kg新西兰大白兔18只,利用自行设计的硅胶针制备兔改良式大泡性角膜病变模型,右眼为手术眼,按随机数字表法分为对照(Con)组和实验(CEC)组,对照组前房注射100μL无细胞DMEM培养液+Y27632,实验组前房注射100μL兔原代角膜内皮细胞(10^(6)个)+Y27632。分别于注射后1 d、4 d、7 d、14 d裂隙灯照相,用前节OCT评价兔角膜混浊程度和角膜厚度。注射后14 d取角膜组织行茜素红和苏木精-伊红染色观察角膜病理学改变。结果 注射后1 d、4 d、14 d两组角膜厚度差异无统计学意义;CEC组在第7天时可达到临床治愈(角膜厚度<500μm),各组间角膜厚度差异有统计学意义(P<0.05)。14 d后病理学观察CEC组角膜各层结构完整,基质纤维排列更为紧密,六边形内皮细胞形态规则。结论 改良式大泡性角膜病变模型制备方法简单可靠,兔原代角膜内皮细胞前房注射治疗有效,为细胞注射疗法转化运用提供了临床前研究结果和合适的动物模型。