小干扰RNA特异性抑制肺肿瘤细胞A549中绿色荧光蛋白基因表达

摘要

目的 :探讨绿色荧光蛋白 (greenfluorescenceprotein ,GFP)特异的小干扰RNA (smallinterferenceRNA ,siRNA)对肺肿瘤细胞A5 4 9中的GFP基因表达的抑制作用 ,建立以真核表达载体释放生成特异基因siRNA的方法。方法 :构建mU6启动子驱动的含有GFP特异siRNA的真核表达质粒 ,转染A5 4 9肺肿瘤细胞 ,观察共转染时不同剂量siRNA对GFP的抑制效应。结果 :针对GFP核酸序列设计的特异性siRNAGFP siRNA可有效抑制其表达 ,并当比例为 1∶1时效果最佳 ,而空质粒载体及无关RNAi无此效应。结论 :以mU6为启动子的含特异RNAi的质粒可作为抑制特异基因表达的一种新的技术手段 ,并且为研究基因功能的一条有效途径。