束缚应激对大鼠代谢和多脏器PPARs表达的影响及吡格列酮的干预作用

摘要

目的：代谢紊乱及相关疾病已成为严重危害人类健康的主要疾病，其发病机制目前尚不清楚。流行病学提示代谢紊乱的发病率增加与人们精神应激增加和活动减少关系密切。本试验以束缚应激大鼠为模型，1、观察束缚应激对大鼠血脂、血糖的影响及肝脏、脂肪、肌肉和心肌等重要代谢和应激器官PPARs的变化，初步探讨PPARs在应激代谢中的作用；2、观察TZDs类降糖药吡格列酮对束缚应激大鼠代谢的干预作用及作用机制，为代谢紊乱的治疗提供试验依据。
　　 方法：1、雄性Wister大鼠，分为正常对照组（C）、束缚1周组（R1）、束缚2周（R2）和束缚4周组（R4），测定各组大鼠血糖、TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA、血清皮质酮、胰岛素和去甲肾上腺素。以RT-PCR和western blot技术测定各组大鼠肝脏、肌肉、心肌和脂肪中PPARa、PPARβ/δ、PPARγ，、GLUT-4、LPL和CPT-I（肝脏为L-CPT，肌肉、心肌和脂肪为M-CPT）mRNA和蛋白的表达。2、雄性Wister大鼠，分为正常对照组（C2）、束缚应激组（R）、束缚应激加小剂量吡格列酮治疗组（P10，10mg/kg·d）和束缚应激加大剂量吡格列酮治疗组（P20，20mg/kg·d）。应激大鼠给予4周束缚应激后测定各组大鼠血糖、TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA、血清皮质酮、胰岛素和去甲肾上腺素。以RT-PCR和western blot技术测定各组大鼠脂肪中PPARγ、GLUT-4和LPL mRNA和蛋白的表达。
　　 结果：1、与C组大鼠相比，R1、R2、R4组大鼠血糖、TG、HDL-C、FFA、皮质酮、去甲肾上腺素和胰岛素明显升高（血糖R1、R2、R4组，HDL-C R2、R4组去甲肾上腺素R4组，胰岛素R1组P<0.05；其余P<0.01），胰岛素敏感指数降低（P<0.01），TC改变不明显（P>0.05），只有R1组LDL-C降低（P<0.05）。2、与R组大鼠相比，P20组大鼠血糖明显降低（P<0.05），两吡格列酮治疗组TG、FFA、胰岛素水平明显降低（P<0.01），胰岛素敏感性增加（P<0.01），TC、LDL-C、HDL-C、皮质酮、去甲肾上腺素变化不明显（P>0.05）。与C2组大鼠相比，P20组大鼠HDL-C明显升高（P<0.05），两吡格列酮治疗组HDL-C、皮质酮、去甲肾上腺素皮质酮、去甲肾上腺素升高（P<0.01），LDL-C降低（P10组P<0.05，P20组P<0.01），血糖、TG、TC、FFA、胰岛素、胰岛素敏感指数无明显差别（P>0.05）。3、与C1组大鼠相比，R1、R2、R4组大鼠肝脏中PPARa、L-CPTmRNA和蛋白表达明显升高（P<0.01），PPARβ/δ、PPARγ、GLUT-4 mRNA和蛋白表达明显降低（PPARβ/δ蛋白R1组P<0.05，其余P<0.01），LPL mRNA和蛋白表达变化不明显（P>0.05）；4、与C1组大鼠相比，R1、R2、R4组大鼠肌肉中PPARα、PPARβ/δ、PPARγ、GLUT-4、LPL和M-CPTmRNA和蛋白表达明显降低（M-CPTmRNA R1组、PPARβ/δ蛋白R1组P<0.05，其余P<0.01）；5、与C1组大鼠相比，R1、R2、R4组大鼠心肌中PPARα、LPL和M-CPTmRNA和蛋白表达明显升高（PPARαmRNA R2组、M-CPT mRNA R2组、M-CPT蛋白R4组P<0.05，其余P<0.01）；PPARγ、GLUT-4mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.01），PPARβ/δmRNA和蛋白表达变化不明显（P>0.05）；6、与C1组大鼠相比，R1、R2、R4组大鼠脂肪中PPARα、PPARβ/δ、PPARγ2、GLUT-4、LPL、M-CPTmRNA和蛋白表达明显降低（GLUT-4mRNA R1组、LPLmRNA R2和R4组、LPL蛋白R1和R4组P<0.05，其余P<0.01）；7，与R组大鼠相比，两吡格列酮治疗组大鼠脂肪中PPARγ、GLUT-4、LPLmRNA和蛋白表达明显升高（PPARymRNA、GLUT-4mRNA均P10组P<0.05，P20组P<0.01；其余P<0.01）。与C2大鼠相比，P10组大鼠脂肪中LPLmRNA、PPART、GLUT-4和LPL蛋白表达仍明显降低（P<0.05），P10组大鼠脂肪中PPARγ和GLUT-4mRNA、P20组大鼠脂肪中PPARγ、GLUT-4、LPLmRNA和蛋白表达无明显差别（P>0.05）。
　　 结论：1、束缚应激大鼠存在代谢紊乱，以血糖和TG升高为主；2、束缚应激可影响大鼠肝脏、肌肉、心肌和脂肪PPARs及其调控基因mRNA和蛋白表达发生变化，这些变化可能与束缚应激导致的代谢紊乱有关；3、吡格列酮可通过增加脂肪中PPAR γ及其调控基因表达和活性，改善束缚应激大鼠的代谢紊乱。

目录

文摘

英文文摘

前言

参考文献

第一部分 束缚应激对大鼠代谢的影响及吡格列酮的干预作用

材料与方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第二部分 束缚应激对大鼠肝脏中PPARs表达的影响

材料与方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第三部分 束缚应激对大鼠肌肉中PPARs表达的影响

材料与方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第四部分 束缚应激对大鼠脂肪中PPARs表达的影响及吡格列酮的干预作用

材料与方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第五部分 束缚应激对大鼠心肌中PPARs表达的影响

材料与方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

总结和展望

综述一

参考文献

综述二

参考文献

缩略词表

攻读学位期间发表文章

致谢