舌鳞癌及前哨淋巴结近红外荧光活成体成像的实验研究

摘要

口腔鳞状细胞癌是头颈部常见的恶性肿瘤,而舌鳞状细胞癌多年来一直位于口腔鳞状细胞癌中发病率的第一位,且易早期即出现颈淋巴结转移,常引起严重的口腔颌面畸形及功能障碍并威胁患者生命,早期准确诊断舌癌及淋巴结转移是提高舌鳞癌患者生存率和生存质量的关键因素。
　　 目的：运用荧光活体成像技术,了解近红外荧光材料量子点Qdot800和Alexa680染料及其标记的尼妥珠单克隆抗体在舌鳞癌活体非侵入性诊断、定位及前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)示踪中的研究价值.
　　 方法：利用近红外荧光材料量子点Qdot800和Alexa680染料分别标记尼妥珠单克隆抗体,观察其对固定的人舌鳞癌细胞系Toca8113及其活细胞的标记情况,建立 Tcca8113舌鳞癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,将两种标记材料经尾静脉注射后经小动物活体成像系统进行荧光成像,观察其对活体内肿瘤的靶定和显像.研究还将Qdot800和Alexa680染料分剐注射于裸鼠及兔的舌部,进行荧光成像后观察两种材料对舌SLN的示踪效果。
　　 结果：近红外荧光材料量子点Qdot800争Alexa680染料都能成功的与尼妥珠单克隆抗体偶联,偶联物对固定的人舌鳞癌细胞系Tcca8113及其活细胞的标记效率高,荧光强,MTT试验表明两种偶联物都对Tcca8113细胞生长抑制作用明显,Qdtot800标记的尼妥珠单克隆抗体不能在活体内靶定舌鳞癌移植瘤,但Alexa680标记的尼妥珠单克隆抗体能在活体内靶定舌鳞癌移植瘤,靶定后呈现明亮的荧光,与周围正常组织形成明显对比.Qdlot800和Alexa680都对动物模型的舌前哨淋巴结示踪效果良好,能在活体内清楚地显示舌部注射后引流的颈部前哨淋巴结位置,但Qdot800较Alexa680的荧光强度高、持续时间长,且长时间停留于SLN内。
　　 结论：近红外荧光材料量子点Qdot800和Alexa680染料都能标记尼妥珠单抗,制备成的荧光抗体探针在体外都可以靶定Tcca8113细胞,Qdot800不能在活体内靶定肿瘤成像,而Alexa680活体内靶定肿瘤且荧光成像效果好,两种材料都能进行舌前哨淋巴结的示踪,但Qdot800较Alexa680更适于SLN示踪研究。