胃癌XELOX、肺癌GP化疗对肠道微生物的影响及口服地衣芽孢杆菌干预的研究

摘要

目的:肿瘤化疗胃肠道反应为一种主要的毒副作用，在临床上可表现为恶心、呕吐、腹痛及腹泻等一系列症状。近期的研究提示有的化疗药物相关肠道毒副反应与肠道菌群及其代谢产物改变密切相关。目前，针对胃癌、肺癌的化疗对肠道微生物的影响尚未见详细报道，地衣芽孢杆菌对肿瘤化疗期间肠道菌群是否具有保护作用缺乏研究。本课题研究胃癌、肺癌化疗对肠道菌群的影响，以及益生菌制剂地衣芽孢杆菌胶囊(整肠生)在胃癌、肺癌化疗过程中对肠道菌群的作用。
　　方法:选取行胃癌术后辅助化疗以及无法手术治疗的非小细胞肺癌患者各20例。随后将胃癌及化疗患者肺癌化疗患者随机等分为两组，其中整肠生组在化疗期间全程服用整肠生(地衣芽孢杆菌活菌胶囊)，对照组仅给予化疗常规用药。于化疗开始前留取粪便标本，此后在化疗期间每隔5日、连续留取患者粪便标本。使用PCR法提取粪便标本的DNA，随后采用高通量测序的方法检测16SrDNA的V4和V5高变区。首先动态观察各组患者化疗期间肠道菌群结构的变化，随后分胃癌部分和肺癌部分、分别对比整肠生组和对照组之间不同时间点上肠道微生物结构变化的差异。统计软件使用SPSS19.0。两组间均数的比较使用Student-t方法，多组间的比较采用单因素方差分析(ANOVA)或Post-hoc Tukey检验，随后再将多个组之间均数的差异使用Post-hoc Tukey检验或Post-hoc Conover-Inman法的方法进行两两比较。检验水准取0.05，当P值＜0.05时即认为结果具有统计学意义。
　　结果:按照研究制定的入组标准，共有20名胃癌术后辅助化疗患者以及20名肺癌化疗患者入选本项研究。20名胃癌患者及20名肺癌患者分别随机为益生菌组及对照组。两组的各项基线资料无统计学差异。两种肿瘤的整肠生组化疗相关腹泻的发生率显著低于对照组(20％ vs45％，P＜0.05)。胃癌及肺癌患者在化疗的初始阶段(即给药后第5日)肠道菌群的多样性明显下降，化疗第10日后菌群多样性有所回升，直至化疗末期逐渐恢复至化疗前的水平，化疗期间全程服用整肠生可加速患者肠道菌群多样性的恢复。整肠生组患者的肠道菌群厚壁菌门丰度显著高于对照组，而对照组的拟杆菌门丰度要显著高于益生菌干预组。在肠道菌群总数及多样性下降最为明显的化疗初始期(化疗第5日)，整肠生组的Prausnitzii菌属、粪杆菌属Faecalibacterium、瘤胃球菌属Ruminococcus以及布氏瘤胃球菌bromii等菌属等菌的丰度显著升高，而克雷伯杆菌Klebsiella、大肠杆菌Escherichia coli，肠球菌Enterobacteriaceae，变形杆菌Proteobacteria以及Gamma变形杆菌Gammaproteobacteria等菌的丰度则显著低于对照组。
　　结论:1.胃癌XELOX、肺癌GP化疗期间给予益生菌制剂地衣芽孢杆菌口服可显著降低腹泻症状的发生率;2.化疗期间，给药后第5日肠道菌群多样性下降最为明显，给予益生菌制剂地衣芽孢杆菌口服可加速肠道菌群多样性的恢复;3.给予地衣芽孢杆菌口服可在化疗第5日显著改变肠道菌群的构成。

目录

声明

常用英文缩写一览表

摘要

前言

研究对象与方法

一、研究对象

二、临床资料

三、粪便标本留取及处理

结果

一、临床资料

二、DNA提取及生物信息学分析

三．益生菌药品检验

讨论

结论

参考文献

文献综述 益生菌与肿瘤化疗的相关研究进展

攻读博士学位期间发表论文(第一作者)

致谢