摘要
ABSTRACT
一.文献综述
1.1水稻雄性不育的分子生物学研究进展
1.1.1植物雄性不育的现象及其意义
1.1.2植物雄性不育的遗传理论
1.1.3水稻雄性不育的细胞生物学基础
1.1.4水稻雄性不育的生理生化特征
1.1.5水稻线粒体基因组与细胞质雄性不育的研究
1.2分子标记技术及其发展状况
1.2.1遗传标记的发展及种类
1.2.2 DNA分子标记的种类和特点
1.2.3 RAPD的基本原理及其应用
二.引言
三.实验思路
四.材料与方法
4.1实验材料
4.1.1生物材料
4.1.2主要化学试剂
4.1.3克隆载体及宿主菌
4.1.4主要仪器设备
4.1.5主要缓冲液组成及溶液配制
4.2实验方法
4.2.1水稻线粒体黄化苗的培育
4.2.2水稻线粒体DNA的提取
4.2.3水稻线粒体DNA的RAPD条件优化
4.2.4 RAPD引物的筛选及差异片段的标记
4.2.5特异扩增片段的回收及连接
4.2.6特异扩增片段DNA的克隆
4.2.7重组质粒的酶切鉴定
4.2.8重组质粒的PCR鉴定
4.2.9探针制备及Southern杂交分析
4.2.10水稻Ⅱ-32不育系，保持系和杂种一代的线粒体RNA的提取
4.2.11探针制备及RNA斑点杂交分析
4.2.12序列测定和分析
五.结果与分析
5.1水稻线粒体DNA的检测
5.2 RAPD条件的优化
5.3引物筛选的结果
5.4差异片段OPJ18-1000、OPJ18-1400的回收和克隆
5.5水稻Ⅱ-32不育系、保持系、杂种一代RNA的提纯
5.6差异片段的组织特异性分析
5.7差异片段的测序和序列分析
六.讨论
6.1影响RAPD反应的因素
6.2水稻线粒体RNA的提取
6.3水稻线粒体DNA的提取
6.4线粒体DNA与细胞质雄性不育
6.5水稻细胞质雄性不育的深入研究
七.结论
参考文献
缩略词表
致谢
附录
