脊髓灰质炎病毒和甲型肝炎病毒感染与细胞凋亡关系的研究

摘要

细胞凋亡(apoptosis)是多细胞针对细胞内外刺激产生的由基因调控的具有信号传导和信号级联放大的能量依赖性的生理性细胞死亡.病毒感染使细胞产生的细胞病变(cytopathotic effect,CPE)现象与细胞凋亡的关系是值得探讨的问题.脊髓灰质炎病毒(poliovirus)感染细胞以后产CPE,而体外培养持续性感染的甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)不产CPE,为研究这些特性与细胞凋亡的关系,在实验中选用poliovirus中Ⅲ-2株和不产CPE的HAV H2和L8病毒株感染人胚肺二倍体细胞KMB17进行研究.

目录

Abstract

前言

材料与方法

1材料

1.1细胞

1.2病毒毒株

1.3主要试剂

1.4主要仪器

2方法

2.1细胞培养

2.2Poliovirus的细胞培养及取样

2.3Poliovirus感染细胞的形态观察

2.4细胞流式仪检测DNA凋亡峰

2.5AnnexinV联合PI法检测细胞早期凋亡

2.6Poliovirus感染性滴度的测定

2.7Poliovirus感染细胞存活率检测

2.8DNA的电泳分析

2.9抗氧化剂与poliovirus繁殖

2.10HAVH2株与细胞凋亡

2.11HAVL8株与细胞凋亡

结果与分析

1Poliovirus感染人二倍体细胞KMB17后的繁殖与细胞存活率

2Poliovirus感染后KMB17的形态特征

3Poliovirus感染的细胞的流式细胞仪检测

4Poliovirus感染的细胞DNA断裂分析

5抗氧化剂对Poliovirus感染性滴度的影响以及与细胞凋亡率的关系

6HAVH2病毒的增殖动力曲线及其感染细胞的存活率曲线

7H2株感染细胞后的形态学和生化特征分析

8 凋亡诱导剂对H2株感染的KMB17细胞的影响

9Poliovirus对H2感染的KMB17细胞凋亡率的影响

10HAVL8株增殖动力学曲线及其感染细胞的存活率曲线

11HAVL8株感染细胞以后的形态学和DNA生化特征分析

12凋亡诱导剂对HAVL8感染细胞的影响

13Po1iovirus对L8感染的KMB17细胞凋亡的影响

讨论

1细胞凋亡检测方法的探讨

2Poliovirus中Ⅲ-2株诱导CPE机制

3抗氧化剂对poliovirus诱导的细胞凋亡的影响

4HAVH2与细胞凋亡

5HAVL8株与细胞凋亡

6细胞凋亡与病毒繁殖

7CPE与细胞凋亡

结论

文献综述 病毒感染与细胞凋亡关系的研究进展

参考文献

附录（一）缩写词

附录（二）溶液配方

致谢

个人简历