亚硒酸钠诱导人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞凋亡机制的研究

摘要

该研究试图观察另一种能诱生ROS的化合物——亚硒酸钠(Na<,2>SeO<,3>)——对NB4细胞凋亡和分化的影响,探讨其作用机制以及ATRA对其作用的影响,并比较Na<,2>SeO<,3>与As<,2>O<,3>诱导细胞凋亡机制的异同以及两者对正常骨髓造血前体细胞的影响.1.体外实验表明:在预计临床允许达到的浓度(5.0-20μmol/L),Na<,2>SeO<,3>可抑制NB4、HL-60和U937等白血病细胞以及原代培养的APL、M2和M5细胞的增殖及存活,并诱导凋亡,提示Na<,2>SeO<,3>有可能成为一种具有广谱的抗白血病作用的凋亡诱导剂;但该研究未发现Na<,2>SeO<,3>具有诱导NB4细胞分化成熟的活性;2.Na<,2>SeO<,3>诱导NB4细胞凋亡的主要机制是直接消耗细胞内的GSH,增加细胞内ROS负荷,使Δψm丧失,进而激活Caspase-3样蛋白酶,并裂解抗凋亡蛋白Bcl-2;3.ATRA可以显著增强Na<,2>SeO<,3>诱导凋亡的活性;4.Na<,2>SeO<,3>与As<,2>O<,3>在诱导凋亡方面,特别是在凋亡的启动环节上具有完全不同的作用机制,前者可直接消耗细胞内的GSH,而后者则是抑制抗氧化酶活性,从而增加细胞内的ROS负荷;若提高细胞内GSH基础水平,NB4细胞对As<,2>O<,3>诱导凋亡的敏感性降低,但对Na<,2>SeO<,3>诱导凋亡的敏感性则进一步增强;5.Na<,2>SeO<,3>对正常骨髓造血前体细胞CFU-GM的抑制作用明显低于As<,2>O<,3>;6.基于Na<,2>SeO<,3>有可靠的诱导凋亡的活性、Na<,2>SeO<,3>联合ATRA具有良好的协同作用,以及Na<,2>SeO<,3>与As<,2>O<,3>在作用机制上不同,提示Na<,2>SeO<,3>对APL(特别是耐药复发的APL)以及其他类型白血病可能具有治疗应用价值,值得进一步研究证实.Na<,2>SeO<,3>诱导细胞凋亡的机制以及与ATRA的协同作用仍需深入探讨.

目录

前言

第一部分：Na2SeO3诱导NB4细胞凋亡的机制研究

材料与方法

实验结果

讨论

小结

第二部分：ATRA对Na2SeO3诱导NB4细胞凋亡作用的影响

结论

附表

参考文献：

附录一：中英文缩略词

附录二：主要试剂、耗材、仪器设备以及溶液和缓冲液的配制

综述：

致谢