菟箭合剂对糖尿病大鼠肾小球系膜细胞表型转化的作用

摘要

研究背景和目的:肾小球细胞外基质的蓄积是糖尿病肾病主要病理改变之一,增殖性肾小球疾病中系膜细胞的表型转化与肾小球细胞外基质的蓄积有关,非增殖性肾小球疾病糖尿病肾病是否也存在系膜细胞表型转化目前尚不清楚.该研究的目的在于探讨糖尿病大鼠肾小球系膜细胞表型转化的情况及其与细胞外基质蓄积的关系,并观察中药菟箭合剂、缬纱坦和汉防己甲素的作用.方法:SD大鼠行左肾切除后,用链脲佐菌素(STZ,45mg/kg)一次性腹膜内注射的方法制作糖尿病模型;然后将其分为糖尿病组(DM组,n=8)、缬沙坦治疗组(VT组,n=8)、中药菟箭合剂治疗组(ZY组,n=9)和汉防己甲素治疗组(HJ组,n=8),另有8只单肾切除未注射STZ的对照组(QC组)和8只鼠龄匹配的正常对照组大鼠(NC组).VT组、ZT组和HJ组分别在单肾切除大鼠STZ注射后第4天开始灌喂缬沙坦(20mg/kg/d)、菟箭合剂(20g/kg/d)和汉防己甲素(40mg/kg),12周时处死,对各组大鼠肾脏标本进行常规肾脏病理观察,并用免疫组化的方法观察大鼠肾小球内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Ⅳ型胶原、转移生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的表达情况,用计算机病理图像分析软件检测肾小球系膜及基底膜相对面积、肾小球内α-SMA、TGF-β1、MMP-9、TIMP-1免疫组化显色相对面积.对肾小球α-SMA阳性显色相对面积与其它指标用SSPS统计分析软件进行二元变量Pearson相关分析.结论:该研究首次证实了单肾切除糖尿病大鼠中存在显著的肾小球系膜细胞表型转化,系膜细胞表型转化与糖尿病大鼠肾小球队TGF-β1的大量分泌,肾小球细胞外基质的蓄积显著相关.中药菟箭合剂和缬纱坦治疗后可以明显减轻糖尿病大鼠肾小球系膜细胞的表型转化,下调肾小球TGF-β1蛋白的表达及减轻肾小球细胞外基质的蓄积.二者均可显著降低糖尿病大鼠的尿蛋白排泄量,但菟箭合剂降低尿蛋白排泄量的作用更为显著.中药复方菟箭合剂对糖尿病肾病的防治作用值得进一步研究.该研究还观察到,在单肾切除糖尿病大鼠中使用40mg/kg体重的汉防己甲素可造成大鼠明显的肾小管损伤,使糖尿病大鼠血浆白蛋白降低.