df4基因的分子克隆及其表达对肿瘤细胞生长特性及相关基因表达的影响

摘要

为了研究多胺生物合成抑制引起细胞生长抑制及分化、凋亡诱导的分子机制,探索肿瘤治疗的新途径,本文克隆了df4基因cDNA全长序列;对序列结构进行了生物信息学的初步预测分析;对DFMO处理及用df4/CMV转染L78的细胞表型变化进行了初步观察,实验结果表明:1、克隆的df4全长cDNA序列为1757bp,编码91个氨基酸的蛋白质,分子量预测为11KD,等电点为11.28,登录GenBank,确认号为AY303997,没有发现有同源序列.2、DFMO处理L78细胞引起细胞生长抑制及凋亡诱导.3、DFMO不仅能诱导HL60细胞而且亦能诱导L78细胞中df4基因表达、同时使L78细胞中端粒酶活性减弱;下调人肺癌相关抗原基因ALT-04ag及P21<'ras>癌基因的表达,而上调Fas基因的表达.4、证明了df4/CMV转染的L78细胞中有df4基因表达;其表达引起了L78的生长抑制和凋亡诱导,其中亦伴有ALT-04ag及P21<'ras>基因表达下调和Fas基因的表达上调.以上结果提示抑制多胺生物合成可诱导肿瘤细胞中df4基因的表达、其表达调控与肿瘤相关的基因表达密切相关,从而在引起肿瘤恶性表型逆转中可能起重要作用,因此df4基因的功能有待深入研究.

目录

缩略语表

前 言

材料与方法

实验结果

第一部分 经DFMO处理的肿瘤细胞HL60df4基因的表达、全长序列的克隆及分析

第二部分 经DFMO处理或用df4基因真核表达质粒转染表达的L78肿瘤细胞的生长特性及相关基因表达调控

讨 论

小 结

参考文献

文献综述 多胺与肿瘤相关基因的表达调控

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致 谢