粘附分子CD146在系统性血管炎临床和发病机制中意义的研究

摘要

目的:研究CD146在系统性血管炎和系统性红斑狼疮(SLE)患者的血浆、外周血白细胞、肾脏及血管壁的表达情况，观察其在临床活动期和缓解期的动态变化，并分析其与临床炎症指标的相关性，探讨其在系统性血管炎发病机制中的可能作用。 方法:1.夹心ELISA方法检测74例系统性血管炎[白塞病(BD)9例，大动脉炎(TA)11例，结节性多动脉炎(PAN)8例，韦格纳肉芽肿(WG)24例，显微镜下多血管炎(MPA)18例，变应性肉芽肿性血管(CSS)炎6例]和17例SLE患者可溶性CD146(sCD146)和TNF-α水平，分析其与临床炎症指标和TNF-α的相关性。其中23例患者分别在活动期和治疗好转后分别检测以观察sCD146的动态变化。34例性别和年龄匹配的健康体检者作为正常对照。 2.采用流式细胞术检测42例系统性血管炎(BD4例，TA9例，PAN3例，WG11例，MPA13例，CSS2例)和15例SLE患者外周血白细胞CD146的表达。其中23例患者在活动期时及治疗好转后分别进行检测。将检测结果与临床资料进行相关性分析并观察其动态变化。70人次同时收集了血浆进行sCD146的检测。20例正常人抗凝血来源于健康体检者。 免疫印迹方法检测白细胞CD146蛋白的表达，RT-PCR检测CD146mRNA的表达。培养内皮细胞株VEC.304，作为蛋白和RT-PCR检测时的阳性对照。3.HE和免疫组化染色分析11例AASV、13例LN、2例过敏性紫癜肾病和1例IgA肾病肾活检标本冰冻切片CD146及CD31的表达异同。其中23例同时采集了血样进行sCD146和外周血白细胞CD146的检测。10例正常肾组织和10例肾癌组织作为血管的对照。另取类风湿关节炎滑膜标本5例和骨性关节炎滑膜标本3例。 结果:1.MPA患者组血浆中，sCD146的表达较正常人明显升高(p＜0.01)，其水平与年龄和血肌酐相关，与炎症指标和疾病活动指数以及TNF-α无关；其他各组与正常人相比无差异，但TA组的水平最低。活动期及缓解期sCD146的水平分别为334.7±123.3ng/ml和412.9±146.1ng/ml，二者之间差异有显著性(p=0.003)。 2.首次研究发现AASV和SLE组活动期外周血各类白细胞尤其是中性粒细胞CD146的表达明显升高，但与炎症指标和疾病活动指数无关，大剂量激素和免疫抑制剂治疗能使CD146的表达明显下降。少数其他结缔组织病(CTD)患者也有阳性发现。目前国际上尚未见报道。 3.AASV组均为新月体型肾炎Ⅲ型，SLE患者中LN-Ⅲ(A)3例，合并V1例；LN-ⅣG(A)型4例，LN-ⅣS(A)型3例，LN-Ⅱ型3例。肾脏和血管CD146的染色主要位于大、中血管和部分小血管的内皮细胞及平滑肌细胞，但与CD31的表达强度和部位不同。肾小球内皮细胞和肾小管及炎症细胞CD146的染色基本为阴性，与血浆sCD146的水平及外周血白细胞的表达不一致。 结论:1.MPA患者sCD146的水平明显升高，与年龄和血肌酐相关，也许反映了广泛而严重的微、小血管内皮损伤，为MPA的临床诊断提供了一个新的标志分子；其他各组与正常人相比无差异，但TA组水平最低，提示与MPA的内皮损伤不同。 2.CD146在系统性血管炎尤其是AASV和SLE活动期外周血各类白细胞中存在激活现象，随激素和免疫抑制剂治疗病情好转而转阴，提示其在发病机制中可能起了重要的作用，并为治疗提供了新的靶向。 3.外周血白细胞CD146的表达从活动期到好转期呈下降趋势，而sCD146呈上升趋势，提示二者其在发病机制中可能相互关联，但有待于更深入的研究。 4.AA98mAb仅能识别大中血管的内皮细胞和平滑肌细胞及部分小血管内皮CD146的表达。外周血白细胞CD146的表达与血浆sCD146的水平均与组织CD146的表达不一致，提示其不能反映组织内皮细胞原位激活的情况。

目录

英文缩略写及注释

总前言

第一部分系统性血管炎患者血浆可溶性CD146的检测及临床意义

前 言

材料与方法

结 果

讨论

结论

参考文献

第二部分系统性血管炎患者外周血白细胞CD146的表达及在临床和发病机制中的意义

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第三部分系统性血管炎患者肾脏和血管中CD146的表达及意义

前 言

材料与方法

结果

讨 论

结 论

参考文献

病例报告白塞病突发假性动脉瘤破裂致死1例

总结

创新之处

文献综述1：粘附分子CD146

文献综述2：粘附分子与血管炎

附表：伯明翰系统血管炎活动指评分

致谢