眼眶成纤维细胞局部分泌的IGF-1是甲状腺相关眼病的致病因素

摘要

目的：
　　 观察胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)在甲状腺相关眼病(TAO)患者眼眶成纤维细胞(OF)的表达及在TAO发病机制中的作用。研究TAO患者临床病情活动度与眼眶局部分泌和全身循环中IGF-1含量的相关性，及IGF-1在TAO发病机制中的作用。
　　 方法：
　　 取TAO患者及正常人球后结缔组织，体外培养OF。通过共聚焦显微镜观察，流式细胞仪检测IGF-1R的表达。此外，留取18例TAO患者及16例年龄性别匹配的正常人外周血，并将其中5例TAO患者和5例正常人的眼眶结缔组织培养成纤维细胞。ELISA法测定所有TAO患者和正常人外周血总IGF-1和游离IGF-1的含量，并测定成纤维细胞培养基中的IGF-1含量，通过MTT生长实验观察生长抑素奥曲肽对其增殖的作用。定量PCR法测定成纤维细胞IGF-1的mRNA水平。
　　 结果：
　　 经流式细胞仪测定，TAO患者的OF表达IGF-1R为72.6％±10.4，正常组的IGF-1R为27.8%±10.7，两组差异具有显著的统计学差异(P＜0.05)。共聚焦显微镜观察及定量分析发现TAO患者OF表达IGF-1R较正常对照增多(P＜0.05)，且IGF-1R主要位于OF的细胞核周围及细胞质内。在观察的72小时内，TAO患者和正常人体外培养的OF均能分泌IGF-1，且TAO患者的成纤维细胞分泌IGF-1比正常人多。IGF-1的分泌作用和成纤维细胞的生长作用均能被奥曲肽抑制。定量PCR结果显示TAO患者成纤维细胞IGF-1的mRNA水平较正常人高出两倍，该差异具有显著统计学意义(P＜0.05)，且该mRNA水平的上调能被奥曲肽抑制。TAO患者血浆中总的及游离的IGF-1与正常人无明显差异，与临床活动度无关，但TAO患者成纤维细胞分泌的IGF-1与临床活动度成正相关(r=0.97，P=0.017)。
　　 结论：
　　 通过流式细胞术和共聚焦显微镜观察发现，与正常人相比，TAO患者的OF高度表IGF-1R。眼眶局部分泌的IGF-1与TAO患者的临床病情活动度成正相关，而非系统循环中的IGF-1。后者在TAO患者和正常人之间无显著差异。因此，局部自分泌或旁分泌的IGF-1参与了TAO的病理机制。奥曲肽对TAO患者成纤维细胞生长和IGF-1分泌的抑制作用解释了生长抑素类药物治疗TAO的机制。