改性PBT平板膜对血浆蛋白吸附及血小板、血细胞黏附的初步研究

摘要

背景：蛋白与材料表面的相互作用一直是生物相容性领域研究的重点之一。当材料表面与含有可溶性蛋白的液体（血液，组织液等）接触时，首先是蛋白质迅速的吸附在材料表面，其次才是细胞。细胞与吸附在材料表面的蛋白分子层相互作用，而不是与材料直接接触。因而，在一定程度上调整蛋白质层在生物材料表面的吸附状态，可以调控细胞与吸附蛋白质层的特异性相互作用等一系列信号转导，来决定细胞的生物应答。因此，控制材料表面吸附蛋白的数量，类型，以及蛋白质的方向，构象和排布方式从而控制细胞应答成为重要研究方向。 目的：制备具有不同官能团（-CH3、-COOH、-OH、两性基团）的聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)平板膜，并初步研究其对血浆蛋白吸附情况，及其对白细胞(WBC)、血小板(PLT)的黏附效果。 方法：(1)利用紫外改性的方法，将不同单体接枝到PBT表面得到PBT-AA(-COOH)、PBT-HEMA(-OH)、PBT-SMDB（两性基团）并进行表征。(2)采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定四种材料吸附的HSA、Fgn含量的差异，且不同接枝率是否对蛋白含量有影响。(3)利用SEM观察四种材料在分别吸附HSA和Fgn前后，黏附白细胞、血小板的数量变化。(4)利用AFM力曲线测量蛋白材料间相互作用。 结果：(1)四种材料的亲水性排名顺序为:PBT-HEMA＞ PBT-SMDB＞PBT-AA＞ PBT。(2) PBT-AA的人血清白蛋白(HSA)吸附量远高于其余三者(p＜0.05); PBT和PBT-AA的纤维蛋白原(Fgn)吸附量高于PBT-HEMA和PBT-SMDB(p＜0.05)。(3)四种材料在吸附蛋白前后，白细胞和血小板的黏附量发生显著变化，其中吸附Fgn后，两种细胞量均明显增加，而吸附HSA后白细胞量明显减少。(4)Fgn只对PBT有特异性吸附;HSA对四种材料没有特异性吸附。 结论：HSA对四种材料没有特异性吸附;Fgn则倾向于吸附疏水性表面。Fgn对两种细胞的黏附均有促进作用，而HSA对白细胞的黏附有一定抑制性。HSA对血细胞的影响可能主要由其吸附在材料表面的构象决定，而不是其吸附数量。

目录

摘要

第一章 绪论

1．1 引言

1．2 单一溶液中的蛋白质吸附行为

1．3 复杂成分溶液中的蛋白吸附行为

1．4 材料表面的抗蛋白吸附机理

1．5 蛋白质与细胞间的相互作用

1．6 展望

1．7 课题设计

第二章 改性PBT平板膜的制备与表征

2．1 引言

2．2 材料与方法

2．2．1 主要仪器与试剂

2．2．2 表面改性PBT类材料的制备

2．2．3 改性前后生物材料表征

2．3 结果与讨论

2．3．1 FTIR

2．3．2 元素分析

2．3．3 SEM

2．3．4 亲、疏水性

2．3．5 zeta电位

2．3．6 细胞毒性

2．4 小结

第三章 PBT类改性材料对白蛋白、纤维蛋白原吸附性能的初步研究

3．1 引言

3．2 材料与方法

3．2．1 主要仪器与试剂

3．2．2 血浆中的HSA、Fgn吸附

3．2．3 纯蛋白溶液的吸附

3．2．4 不同接枝率的改性材料HSA、Fgn的吸附

3．2．5 HSA ELISA实验

3．2．6 Fgn ELISA实验

3．3 结果与讨论

3．3．1 HSA

3．3．2 Fgn

3．4 小结

第四章 PBT类改性材料对白细胞、血小板的黏附性能的初步研究

4．1 引言

4．2 材料与方法

4．2．1 主要仪器与试剂

4．2．2 高纯度白细胞悬液及血小板悬液的制备

4．2．3 细胞黏附实验

4．3 结果与讨论

4．3．1 WBC

4．3．2 PLT

4．4 小结

第五章 PBT类改性材料影响凝血功能的初步评价

5．1 引言

5．2 材料与方法

5．2．1 主要仪器与试剂

5．2．2 样品的制备

5．2．3 凝血因子的检测

5．3 结果与讨论

5．3．1 四种材料对凝血功能的影响

5．3．2 接枝率对凝血因子的影响

5．4 小结

第六章 蛋白与材料之间相互作用力

6．1 引言

6．2 材料与方法

6．2．1 主要仪器与试剂

6．2．2 探针的修饰

6．2．3 力曲线

6．3 结果与讨论

6．4 小结

第七章 主要结论与后续工作建议

7．1 主要结论

7．2 后续工作建议

参考文献

附录

致谢

声明