摘要
引言
第一部分 小RNA分子vsRNA1755的生物学性质研究
一、实验材料
1.细胞系和毒株
2.主要试剂及耗材
3.主要仪器
二、实验方法
(一)vsRNA1755分子表达水平检测
(二)vsRNA1755分子来源确认研究
(三)vsRNA1755分子结构特征研究
(四)vsRNA1755分子合成途径研究
三、实验结果
1.vsRNA1755分子表达水平检测
2.vsRNA1755分子来源确认研究
3.vsRNA1755分子结构特征研究
4.vsRNA1755分子合成途径研究
四、讨论
五、小结
第二部分 vsRNA1755分子与靶基因关系的确定
一、实验材料
1.细胞系和毒株
2.主要试剂及耗材
3.主要仪器
二、实验方法
(三)体外转染vsRNA1755模拟物和抑制物,检测宿主细胞IGF1R基因表达
三、实验结果
1.通过miranda软件预测vsRNA1755分子的靶基因
2.双荧光素酶报告系统验证vsRNA1755分子与IGF1R之间的靶定关系
3.体外转染vsRNA1755分子的mimics和inhibitor,通过qRT-PCR检测宿主细胞基因IGF1R的表达水平变化
4.体外转染vsRNA1755分子的mimics和inhibitor,通过Western blot检测宿主细胞基因IGF1R的表达水平变化
四、讨论
五、小结
第三部分 vsRNA1755分子通过靶基因IGF1R激活自噬调控病毒复制
一、实验材料
1.细胞系和毒株
2.主要试剂及耗材
3.主要仪器
二、实验方法
(一)轮状病毒感染激活宿主细胞自噬
(二)vsRNA1755激活宿主细胞自噬
(三)vsRNA1755在轮状病毒感染过程中的调控机制
(一)轮状病毒感染宿主细胞激活自噬
(二)vsRNA1755激活宿主细胞自噬
(三)vsRNA1755在轮状病毒感染过程中的调控机制
四、讨论
五、小结
总结
展望
参考文献
附录
致谢
个人简历
声明