脂肪干细胞辅助脂肪移植治疗局限性硬皮病的相关研究

摘要

目的:分析脂肪移植治疗局限性硬皮病的相关影响因素，探讨脂肪干细胞(ADSCs)辅助脂肪移植治疗局限性硬皮病的可行性。
　　方法:(1)21例脂肪标本:局限性硬皮病患者脂肪标本6例（未使用药物治疗），局限性硬皮病患者脂肪标本5例（曾使用药物治疗），正常脂肪患者脂肪标本10例，提取脂肪标本中的干细胞，分离培养，比较脂肪干细胞数量、形态、增殖能力及成脂能力。(2)激光散斑对比成像方法测定8例局限性硬皮病患者病变部位及正常对侧部位的血流情况。(3)取局限性硬皮病病变部位皮肤标本2例及非硬皮病患者皮肤标本2例，行成纤维细胞培养后与脂肪颗粒混匀后移植入裸鼠，观察脂肪的存活情况。(4)博来霉素硬皮病造模裸鼠18例，正常裸鼠18例，各分为三组:对照组，脂肪移植组，脂肪干细胞+脂肪移植组。术后1月取移植脂肪称重，取注射部位裸鼠皮肤免疫组化测定TGF-β1及Ⅲ型胶原含量。
　　结果:(1)21例患者脂肪干细胞形态学无差异，成脂能力无差异，流式细胞仪检测第3代患者脂肪干细胞的表面标志CD44+都是90％以上，无明显差异。但局限性硬皮病患者（行激素治疗）的干细胞数量较正常人及局限性硬皮病患者（未行激素治疗）明显减少，细胞生长曲线延迟。(2)局限性硬皮病患者病变部位血流灌注为92.69±22.04，正常对侧部位为95.70±20.43，局限性硬皮病病变部位与对侧正常部位血流灌注无明显差异。(3)局限性硬皮病患者成纤维细胞+脂肪移植后脂肪重量约68.24±19.20mg，正常人成纤维细胞+脂肪移植后脂肪重量约88.42±20.15mg。(4)正常裸鼠脂肪移植组脂肪重量102.97±17.87mg，脂肪干细胞+脂肪移植组脂肪重量135.05±27.28mg，硬皮病裸鼠移植脂肪重量77.54±12.40mg，脂肪干细胞+脂肪移植组脂肪重量102.48±23.16mg。脂肪干细胞+脂肪移植的存活率均较单纯的脂肪移植存活率高。(5)对于正常裸鼠，TGF-β1含量对照组为939.34±216.92，脂肪移植组为974.98±470.18，脂肪干细胞+脂肪移植组为967.66±448.74，Ⅲ型胶原含量对照组为623.85±113.84，脂肪移植组为605.73±217.17，脂肪干细胞+脂肪移植为599.34±89.39。对于硬皮病裸鼠，TGF-β1含量对照组为1945.95±330.77，脂肪移植组为1418.86±376.82，脂肪干细胞+脂肪移植为1132.12±190.69，Ⅲ型胶原含量对照组为2629.39±746.62，脂肪移植组为1531.74±836.41，脂肪干细胞+脂肪移植为946.92±448.90。正常裸鼠经脂肪移植或脂肪干细胞+脂肪移植后TGF-β1含量及Ⅲ型胶原含量无明显改变。但对于硬皮病裸鼠，脂肪移植或者脂肪干细胞+脂肪移植可降低硬皮病组裸鼠的TGF-β1含量及Ⅲ型胶原含量，尤其是脂肪干细胞移植后效果更加明显。
　　结论:(1)局限性硬皮病患者的脂肪移植不同于正常人群的脂肪移植，长期应用激素治疗病史及病变部位的微环境是影响硬皮病患者脂肪移植存活的关键因素，而局限性硬皮病患者的病变部位血供较正常侧无明显改变。(2)脂肪干细胞辅助脂肪移植不仅可提高脂肪存活率，同时还可减轻硬皮病裸鼠的皮肤胶原沉积。

目录

摘要

中英文对照

前言

参考文献

实验设计

第一部分 脂肪移植治疗局限性硬皮病的影响因素分析

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 脂肪干细胞辅助脂肪移植治疗硬皮病裸鼠模型

材料和方法

结果

讨论

参考文献

全文总结

文献综述一：局限性硬皮病的发病机制及治疗

文献综述二：脂肪移植最新研究进展

致谢

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