携氧代血浆用于重度失血性休克大鼠复苏的实验研究

摘要

目的:机体由于创伤、失血等各种原因引起循环血量减少而发生失血性休克，会产生一系列的病理生理变化，导致有效循环血量骤减，组织灌注下降，微循环障碍，无氧代谢增加，组织酸中毒，甚至发生多脏器功能障碍综合征而死亡。液体复苏是治疗失血性休克的一种有效措施。其主要目的是补充血容量，维持血流灌注，改善组织氧供。目前的复苏液虽然具有扩容的能力，但没有携氧功能。血红蛋白类氧载体是一种红细胞代用品，主要应用于创伤急救及失血造成的失血性休克，由于血红蛋白体积远小于红细胞，可以抵达普通红细胞无法通过的区域，高效地为组织供氧。因此，本课题组设计的携氧代血浆，将一种血红蛋白类氧载体（多聚人胎盘血红蛋白）与羟乙基淀粉相结合，使其兼具扩容与携氧能力，前期研究发现携氧代血浆能够提高大鼠存活率并改善微循环障碍，因此本课题将进一步采用重度失血性休克模型，深入研究携氧代血浆的复苏效果。
　　本文采用大鼠失血性休克-复苏模型，研究携氧代血浆对失血性休克大鼠复苏后组织氧分压、灌流量、炎症反应以及心脏、肝脏和肾脏功能酶学及病理学改变的影响。
　　方法:将雄性SD大鼠随机分为携氧代血浆组、大鼠红细胞组和羟乙基淀粉组。采取失血性休克控容模型，使大鼠失血至全身血容量的60％，并按照失血量等体积进行液体复苏，分别回输上述样品。记录并检测基础值、休克、输样末、输样后1h和输样后2h各组血压、心率以及血细胞计数的变化，并于复苏后2h取肝、肾、肺、肠组织进行称重，按照重量体积比1∶9加入冷生理盐水制备成10％组织匀浆，测定各组织MDA和MPO水平，并检测肠组织炎症因子TNF-α和IL-6水平。大鼠心脏、肝脏和肾脏功能酶学指标的检测，包括CK、LDH、AST、ALT、BUN、Cr，分别于基础值、休克、输样后2h和24h各时间点抽取动脉血，离心后留取血浆进行上述指标的检测。另外分别于基础值、休克、输样后24h监测各组灌流量和组织氧分压的变化。最后在复苏后24h，将大鼠处死，快速切取肝、肾和心脏组织，用10％甲醛固定，进行病理切片分析。
　　结果:实验结果显示，失血性休克导致机体血压急剧下降，液体复苏后，各组血压和血气水平均得到部分恢复，携氧代血浆组血压高于羟乙基淀粉组和红细胞组，Lac含量低于羟乙基淀粉组，组织氧分压和灌流量高于羟乙基淀粉组。携氧代血浆能够降低肠组织TNF-α、IL-6、MPO活性。在输样后2h和24h，携氧代血浆组CK和LDH含量均高于羟乙基淀粉组和大鼠红细胞组。三组AST和ALT含量在输样后2h变化不大，但在输样后24h明显升高，携氧代血浆组在输样后24h的ALT水平比其他两组高。与羟乙基淀粉组相比，输样后2h和24h，携氧代血浆组Cr含量较高。病理切片显示大鼠红细胞组心脏、肝脏和肾脏均无病变，携氧代血浆组和羟乙基淀粉组均出现肝脏和肾脏病理学改变，携氧代血浆组心脏也发生了轻度病理学变化。
　　结论:携氧代血浆兼具扩容和携氧能力，能够维持较高的血压水平和组织灌注，将氧气运输到组织中，提高组织氧分压，改善组织氧供和代谢性酸中毒现象。采用携氧代血浆进行液体复苏可以减少中性粒细胞的激活，降低肠组织炎症反应，但复苏后24h大鼠的心脏、肝脏和肾脏发生一定损伤。

目录

摘要

1．1 引言

1．2 研究背景

1．2．1 研究血液代用品的必要性

1．2．2 人工氧载体

1．2．3 血液代用品存在的问题

1．2．4 血液代用品应用前景展望

1．3 课题设计

第二章 携氧代血浆对失血性休克大鼠组织氧分压和灌流量的影响

2．1 引言

2．2 材料与方法

2．2．1 实验动物

2．2．2 实验仪器

2．2．3 实验试剂

2．2．4 实验分组

2．2．5 失血性休克模型制备及液体复苏

2．2．6 指标检测

2．3 统计学分析

2．4 结果

2．4．1 不同时间点各组大鼠MAP的变化

2．4．2 不同时间点各组大鼠血细胞计数的变化

2．4．3 各组大鼠组织氧分压和灌流量的变化

2．5 讨论

本章结论

第三章 携氧代血浆对失血性休克大鼠各组织氧化应激和炎症反应的影响

3．1 引言

3．2 材料与方法

3．2．1 实验动物

3．2．2 实验仪器

3．2．3 实验试剂

3．2．4 60％失血性休克模型制备及液体复苏

3．2．5 血气测定和组织取样

3．2．6 10％组织匀浆的制备

3．2．7 指标检测

3．3 统计学分析

3．4 结果

3．4．1 血气分析

3．4．2 组织脂质过氧化水平

3．4．3 组织中性粒细胞浸润

3．4．4 肠组织炎症因子

3．5 讨论

本章结论

第四章 携氧代血浆对失血性休克大鼠心脏、肝脏和肾脏的影响

4．1 引言

4．2 材料与方法

4．2．1 实验动物

4．2．2 实验仪器

4．2．3 实验试剂

4．2．4 实验分组

4．2．5 60％失血性休克模型的诱导及复苏

4．2．6 指标检测

4．3 统计学分析

4．4 结果

4．4．1 携氧代血浆对失血性休克大鼠心肌酶的影响

4．4．2 携氧代血浆对失血性休克大鼠肝功能酶学的影响

4．4．3 携氧代血浆对失血性休克大鼠肾功能指标的影响

4．4．4 各组大鼠心脏、肝脏和肾脏病理学改变

4．5 讨论

本章结论

5．1 结论

5．2 后续工作建议

参考文献

附录

致谢

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